NCI-H69AR

NCI-H69AR ist ein multiresistentes Derivat der elterlichen Zelllinie des kleinzelligen Lungenkarzinoms (SCLC) NCI-H69. Sie wurde durch kontinuierliche Selektion mit steigenden Konzentrationen von Chemotherapeutika wie Doxorubicin entwickelt. Daher dient NCI-H69AR als wichtiges Modellsystem für die Untersuchung von Mechanismen der erworbenen Arzneimittelresistenz bei SCLC. Diese Zelllinie weist viele der morphologischen und biochemischen Merkmale ihrer Elternlinie auf, zeigt aber eine ausgeprägte Resistenz gegen mehrere zytotoxische Wirkstoffe, was sie für die Untersuchung von Efflux-vermittelten Resistenzmechanismen besonders relevant macht.

Der primäre Mechanismus der Resistenz bei NCI-H69AR ist die Überexpression des Multidrug-Resistenzproteins P-Glykoprotein (P-gp), das durch das MDR1-Gen kodiert wird. P-gp fungiert als ATP-abhängige Efflux-Pumpe, die die intrazelluläre Anreicherung von Arzneimitteln reduziert, insbesondere für Anthrazykline, Vinca-Alkaloide und Epipodophyllotoxine. Darüber hinaus weist NCI-H69AR eine veränderte Expression von membranassoziierten Proteinen, einschließlich Annexin II, auf, was mit Veränderungen der Kalzium-Signalübertragung und des vesikulären Trafficking in Verbindung gebracht werden kann - Prozesse, die bei der Arzneimittelresistenz und der zellulären Stressreaktion eine Rolle spielen. Diese phänotypischen Veränderungen machen NCI-H69AR zu einem wertvollen Modell für die Identifizierung von Modulatoren der Arzneimittelresistenz und für die Bewertung der Wirksamkeit von Wirkstoffen, die auf Efflux-Mechanismen abzielen oder Resistenzwege gänzlich umgehen.

NCI-H69AR wurde auch in vergleichenden Studien mit seiner Elternlinie verwendet, um Veränderungen in der Gen- und Proteinexpression, in den Profilen der Arzneimittelempfindlichkeit und der Reaktion auf pharmakologische Inhibitoren zu beschreiben. Dieser vergleichende Rahmen hilft bei der Klärung der Entwicklung von Arzneimittelresistenzen bei Krebs und trägt zur Entwicklung von Kombinationstherapien bei, die darauf abzielen, resistente Tumore zu re-sensibilisieren. Die Linie wird in der Regel in RPMI-1640-Medium gezüchtet, das mit fötalem Rinderserum angereichert ist, und unter atmosphärischen Standardbedingungen gehalten. Ihre Robustheit und ihr gut charakterisierter Resistenzphänotyp haben ihr einen festen Platz in der präklinischen Forschung zur Arzneimittelresistenz bei Lungenkrebs gesichert.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung