İçeriğe atla
NCI-H69AR
Doku
Metastatik
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
NCI-H69 AR, NCI-H69/AR, H69AR, H-69AR

NCI-H69AR

Cell line · Ürün numarası 305840

NCI-H69AR is a multidrug-resistant derivative of the parental small cell lung carcinoma (SCLC) cell line NCI-H69. It was developed through continuous sele...

€550.00vergi ve kargo hariç

Kişiselleştirme / Öneriler

Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

NCI-H69AR, ebeveyn küçük hücreli akciğer karsinomu (SCLC) hücre hattı NCI-H69'un çoklu ilaca dirençli bir türevidir. Doksorubisin gibi kemoterapötik ajanların artan konsantrasyonlarında sürekli seleksiyon yoluyla geliştirilmiştir. Sonuç olarak, NCI-H69AR, SCLC'de edinilmiş ilaç direnci mekanizmalarının araştırılması için önemli bir model sistem olarak hizmet etmektedir. Bu hücre hattı, ebeveyn hattının morfolojik ve biyokimyasal özelliklerinin çoğunu korur, ancak çeşitli sitotoksik ajanlara karşı derin direnç gösterir, bu da onu özellikle efluks aracılı direnç yollarını incelemek için uygun hale getirir.

NCI-H69AR'daki birincil direnç mekanizması, MDR1 geni tarafından kodlanan çoklu ilaç direnci proteini P-glikoproteinin (P-gp) aşırı ekspresyonunu içerir. P-gp, özellikle antrasiklinler, vinka alkaloidleri ve epipodofilotoksinler için hücre içi ilaç birikimini azaltan ATP'ye bağlı bir akış pompası olarak işlev görür. Ek olarak, NCI-H69AR, anneksin II de dahil olmak üzere, ilaç direnci ve hücresel stres yanıtında rol oynayan kalsiyum sinyali ve veziküler kaçakçılık süreçlerindeki değişikliklerle ilişkili olabilecek membranla ilişkili proteinlerin değişmiş ifadesini sergiler. Bu fenotipik değişiklikler NCI-H69AR'ı ilaç direncinin modülatörlerini tanımlamak ve efluks mekanizmalarını hedefleyen veya direnç yollarını tamamen atlayan ajanların etkinliğini değerlendirmek için değerli bir model haline getirmektedir.

NCI-H69AR ayrıca gen ve protein ekspresyonundaki değişiklikleri, ilaç duyarlılık profillerini ve farmakolojik inhibitörlere yanıtı tanımlamak için ebeveyn hattı ile karşılaştırmalı çalışmalarda kullanılmıştır. Bu karşılaştırmalı çerçeve, kanserde ilaç direncinin evrimini netleştirmeye yardımcı olur ve dirençli tümörleri yeniden duyarlı hale getirmeyi amaçlayan kombinasyon tedavilerinin tasarımına katkıda bulunur. Bu hat tipik olarak fetal sığır serumu ile desteklenmiş RPMI-1640 ortamında kültürlenir ve standart atmosferik koşullar altında muhafaza edilir. Sağlamlığı ve iyi karakterize edilmiş direnç fenotipi, akciğer kanserinde ilaç direnci üzerine klinik öncesi araştırmalarda yerini almıştır.

Doku
Metastatik
Hastalık
Akciğer küçük hücreli karsinomu
Metastaz yeri
Plevral efüzyon
Eş anlamlılar
  • NCI-H69 AR
  • NCI-H69/AR
  • H69AR
  • H-69AR

02Sınıflandırma

Canlı
İnsan
Cinsiyet
Erkek
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Epitelyal
Hücre türü
Epitel benzeri
Tümör oluşturucu
Evet; Evet, çıplak farelerde

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
NCI-H69AR (Cytion katalog numarası 305840)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
9606
Cellosaurus
CVCL_3513

05İfade ve duyarlılık

Mutasyon profili
Mutasyon: PIK3CA, Basit, p.Gly106_Arg108del (c.317_325delGGCAACCGT), Heterozigot (ana hücre hattından).Mutasyon, RB1, Basit, p.Glu748Ter (c.2242G>T), Homozigot (ana hücre hattından).Mutasyon, TP53, Basit, p.Glu171Ter (c.511G>T), Homozigot (ana hücre hattından).

06İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
RPMI 1640, w: 2.0 mM stabil Glutamin, w: 2.0 g/L NaHCO3 (Cytion makale numarası 820700a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %20 FBS ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

08Bağışçı

Bağışçının yaşı
55 yıl
Etnik köken
Kafkas