NCI-H69AR

La NCI-H69AR es un derivado multirresistente de la línea celular parental de carcinoma pulmonar de células pequeñas (SCLC) NCI-H69. Se desarrolló mediante una selección continua en concentraciones crecientes de agentes quimioterapéuticos, como la doxorrubicina. Como resultado, la NCI-H69AR sirve como un sistema modelo clave para investigar los mecanismos de resistencia adquirida a los fármacos en el SCLC. Esta línea celular conserva muchas de las características morfológicas y bioquímicas de su línea parental, pero muestra una resistencia profunda a varios agentes citotóxicos, lo que la hace especialmente relevante para estudiar las vías de resistencia mediadas por eflujo.

El mecanismo principal de resistencia en la NCI-H69AR implica la sobreexpresión de la proteína de resistencia a múltiples fármacos P-glicoproteína (P-gp), codificada por el gen MDR1. La P-gp funciona como una bomba de eflujo dependiente de ATP que reduce la acumulación intracelular de fármacos, particularmente de antraciclinas, alcaloides de la vinca y epipodofilotoxinas. Además, la línea NCI-H69AR presenta una expresión alterada de proteínas asociadas a la membrana, incluida la anexina II, lo que podría estar relacionado con cambios en la señalización del calcio y el tráfico vesicular —procesos implicados en la resistencia a los fármacos y la respuesta celular al estrés—. Estas alteraciones fenotípicas convierten a la línea NCI-H69AR en un modelo valioso para identificar moduladores de la resistencia a los fármacos y para evaluar la eficacia de agentes dirigidos a los mecanismos de eflujo o que eluden por completo las vías de resistencia.

La línea NCI-H69AR también se ha utilizado en estudios comparativos con su línea parental para delinear cambios en la expresión génica y proteica, los perfiles de sensibilidad a los fármacos y la respuesta a inhibidores farmacológicos. Este marco comparativo ayuda a aclarar la evolución de la resistencia a los fármacos en el cáncer y contribuye al diseño de terapias combinadas destinadas a resensibilizar los tumores resistentes. La línea se cultiva típicamente en medio RPMI-1640 suplementado con suero fetal bovino y se mantiene en condiciones atmosféricas estándar. Su robustez y su fenotipo de resistencia bien caracterizado le han asegurado un lugar en la investigación preclínica sobre la resistencia a los medicamentos en el cáncer de pulmón.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.