NCI-H69AR

NCI-H69AR je multirezistentný derivát rodičovskej bunkovej línie malobunkového karcinómu pľúc (SCLC) NCI-H69. Vznikla kontinuálnou selekciou pri zvyšujúcich sa koncentráciách chemoterapeutík, ako je napríklad doxorubicín. NCI-H69AR preto slúži ako kľúčový modelový systém na skúmanie mechanizmov získanej rezistencie na lieky v SCLC. Táto bunková línia si zachováva mnohé morfologické a biochemické vlastnosti svojej rodičovskej línie, ale vykazuje hlbokú rezistenciu voči viacerým cytotoxickým látkam, vďaka čomu je obzvlášť vhodná na štúdium ciest rezistencie sprostredkovaných efluxom.

Hlavný mechanizmus rezistencie v NCI-H69AR zahŕňa nadmernú expresiu proteínu P-glykoproteínu (P-gp), ktorý je kódovaný génom MDR1. P-gp funguje ako efluxná pumpa závislá od ATP, ktorá znižuje intracelulárnu akumuláciu liečiv, najmä antracyklínov, alkaloidov vinca a epipodofylotoxínov. Okrem toho NCI-H69AR vykazuje zmenenú expresiu membránových proteínov vrátane anexínu II, čo môže súvisieť so zmenami v signalizácii vápnika a vezikulárnom obchodovaní - procesmi, ktoré sa podieľajú na rezistencii na lieky a reakcii buniek na stres. Tieto fenotypové zmeny robia z NCI-H69AR cenný model na identifikáciu modulátorov rezistencie na lieky a na hodnotenie účinnosti látok zameraných na mechanizmy efluxu alebo na úplné obídenie ciest rezistencie.

NCI-H69AR sa tiež používa v porovnávacích štúdiách s rodičovskou líniou na vymedzenie zmien v expresii génov a proteínov, profilov citlivosti na lieky a odpovede na farmakologické inhibítory. Tento porovnávací rámec pomáha objasniť vývoj rezistencie na lieky v rakovine a prispieva k návrhu kombinovaných terapií zameraných na opätovnú senzibilizáciu rezistentných nádorov. Línia sa zvyčajne kultivuje v médiu RPMI-1640 doplnenom fetálnym hovädzím sérom a udržiava sa v štandardných atmosférických podmienkach. Jej robustnosť a dobre charakterizovaný fenotyp rezistencie jej zabezpečili miesto v predklinickom výskume rezistencie na lieky pri rakovine pľúc.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke