RAG

La lignée cellulaire RAG est un mutant non réversible résistant à la 8-azaguanine, dérivé d'un adénocarcinome rénal de souris BALB/c. Cette lignée a été développée par des passages alternés de l'animal à la culture de tissus afin d'enrichir la population tumorigène tout en éliminant les fibroblastes stromaux normaux. Les cellules RAG présentent une morphologie ameboïde à épithélioïde avec des processus cytoplasmiques proéminents et sont résistantes aux méthodes de sélection dépendantes de l'hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransférase (HGPRT) en raison de leur déficience enzymatique. Cette résistance a facilité leur utilisation dans les systèmes de sélection biochimique pour les expériences d'hybridation de cellules somatiques.

Les cellules RAG sont largement utilisées comme lignées parentales dans les études de fusion de cellules somatiques en raison de leur compatibilité avec les procédures de fusion utilisant le virus inactivé de Sendai. Lorsqu'elles sont fusionnées avec d'autres lignées cellulaires, telles que LM(TK-) ou WI-38, les hybrides conservent les chromosomes marqueurs et présentent une complémentation biochimique des déficiences métaboliques. Ces hybrides ont permis de cartographier les éléments de régulation génétique et d'étudier l'expression des gènes, en particulier dans les enzymes associées au rein comme l'estérase ES-2. Les hybrides RAG permettent de mieux comprendre la ségrégation chromosomique inter- et intraspécifique et la génomique fonctionnelle.

Outre leur rôle dans les études d'hybridation, les cellules RAG ont servi de modèle pour étudier la régulation épigénétique de l'expression des gènes. Les cellules hybrides impliquant RAG montrent souvent l'extinction et la réexpression de traits génétiques spécifiques, en fonction de la rétention ou de la perte de chromosomes particuliers. Cela fait de la lignée cellulaire RAG un outil précieux pour comprendre la dynamique de la régulation génétique et de la stabilité chromosomique dans les cellules tumorigènes.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie