RAG

RAG ląstelių linija yra negrįžtanti 8-azaguaninui atspari mutantė, gauta iš BALB/c pelių inkstų adenokarcinomos. Ši linija buvo sukurta atliekant pakaitinius gyvūnų ir audinių kultūrų perėjimus, kad būtų praturtinta navikinė populiacija, kartu pašalinant normalius stromos fibroblastus. RAG ląstelės pasižymi nuo ameboidinės iki epitelioidinės morfologijos su ryškiais citoplazminiais procesais ir yra atsparios nuo hipoksantino ir guanino fosforibosiltransferazės (HGPRT) priklausomiems atrankos metodams dėl fermentų trūkumo. Šis atsparumas palengvino jų naudojimą biocheminės atrankos sistemose somatinių ląstelių hibridizacijos eksperimentams.

RAG ląstelės plačiai naudojamos kaip tėvinė linija somatinių ląstelių sintezės tyrimuose dėl jų suderinamumo su sintezės procedūromis naudojant inaktyvuotą Sendai virusą. Susiliejus su kitomis ląstelių linijomis, pavyzdžiui, LM(TK-) arba WI-38, hibridai išlaiko žymėtąsias chromosomas ir pasižymi biocheminiu medžiagų apykaitos trūkumų papildymu. Šie hibridai buvo naudingi nustatant genetinio reguliavimo elementus ir tiriant genų raišką, ypač su inkstais susijusių fermentų, pavyzdžiui, ES-2 esterazės, atžvilgiu. RAG hibridai suteikia žinių apie tarpgrupinę ir vidinę chromosomų segregaciją ir funkcinę genomiką.

Be vaidmens hibridizacijos tyrimuose, RAG ląstelės pasitarnavo kaip modelis tiriant epigenetinį genų raiškos reguliavimą. Hibridinėse ląstelėse, kuriose dalyvauja RAG, dažnai pastebimas specifinių genetinių požymių išnykimas ir pakartotinė raiška, priklausomai nuo tam tikrų chromosomų išlaikymo ar praradimo. Dėl to RAG ląstelių linija yra vertingas įrankis, padedantis suprasti genetinės reguliacijos ir chromosomų stabilumo dinamiką navikinėse ląstelėse.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime