RAG

Celična linija RAG je nepovratna mutanta, odporna na 8-azaganin, pridobljena iz ledvičnega adenokarcinoma miši BALB/c. Ta linija je bila razvita z izmeničnimi prehodi iz živali v tkivno kulturo, da bi obogatili tumorigeno populacijo in hkrati izločili normalne stromalne fibroblaste. Celice RAG imajo ameboidno do epiteloidno morfologijo z vidnimi citoplazemskimi procesi in so zaradi pomanjkanja encimov odporne na selekcijske metode, odvisne od hipoksantin-guanin-fosforibosiltransferaze (HGPRT). Ta odpornost je olajšala njihovo uporabo v biokemičnih selekcijskih sistemih za poskuse hibridizacije somatskih celic.

Celice RAG se pogosto uporabljajo kot starševska linija v študijah fuzije somatskih celic zaradi njihove združljivosti s postopki fuzije z uporabo inaktiviranega virusa Sendai. Pri zlitju z drugimi celičnimi linijami, kot sta LM(TK-) ali WI-38, hibridi ohranijo označevalne kromosome in kažejo biokemično dopolnjevanje presnovnih pomanjkljivosti. Ti hibridi so bili koristni pri kartiranju genetskih regulativnih elementov in preučevanju izražanja genov, zlasti pri encimih, povezanih z ledvicami, kot je esteraza ES-2. Hibridi RAG omogočajo vpogled v medvrstno in znotrajvrstno kromosomsko segregacijo ter funkcionalno genomiko.

Poleg vloge pri hibridizacijskih študijah so celice RAG služile kot model za preučevanje epigenetske regulacije izražanja genov. Hibridne celice, ki vključujejo RAG, pogosto kažejo izumrtje in ponovno izražanje določenih genetskih lastnosti, odvisno od ohranitve ali izgube določenih kromosomov. Zaradi tega je celična linija RAG dragoceno orodje za razumevanje dinamike genetske regulacije in kromosomske stabilnosti v tumorskih celicah.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo