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RAG
ティッシュ
腎臓
病気
マウス腎臓がん
同義語
Rag

RAG

Cell line · 製品番号 305190

The RAG cell line is a nonreverting 8-azaguanine-resistant mutant derived from a renal adenocarcinoma of BALB/c mice. This line was developed through alte...

€430.00税・送料別

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01概要

説明

RAG細胞株は、BALB/cマウスの腎腺癌に由来する非復活性8-アザグアニン耐性変異体である。この株は、正常な間質線維芽細胞を除去しながら腫瘍形成集団を濃縮するために、動物から組織培養への交互継代を経て開発された。RAG細胞は顕著な細胞質突起を持つアメーバ状から類上皮状の形態を示し、酵素欠損のためヒポキサンチン・グアニン・ホスホリボシルトランスフェラーゼ(HGPRT)依存性の選択法に抵抗性である。この耐性により、体細胞ハイブリダイゼーション実験の生化学的選択系での使用が容易になっている。

RAG細胞は不活化センダイウイルスを用いた融合手順に適合するため、体細胞融合研究の親株として広く利用されている。LM(TK-)やWI-38のような他の細胞株と融合させると、ハイブリッドはマーカー染色体を保持し、代謝欠損の生化学的相補性を示す。これらのハイブリッドは、遺伝子制御エレメントのマッピングや、特にES-2エステラーゼのような腎臓関連酵素における遺伝子発現の研究に役立っている。RAGハイブリッドは、種間および種内の染色体分離と機能ゲノミクスに関する洞察を与えてくれる。

ハイブリダイゼーション研究における役割に加えて、RAG細胞は遺伝子発現のエピジェネティック制御を研究するモデルとしても役立っている。RAGが関与するハイブリッド細胞は、特定の染色体の保持または消失に応じて、特定の遺伝形質の消滅と再発現をしばしば示す。このためRAG細胞株は、腫瘍性細胞における遺伝的制御と染色体の安定性の動態を理解する上で貴重なツールとなっている。

ティッシュ
腎臓
病気
マウス腎臓がん
同義語
  • Rag

02分類

生物
マウス
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
アメーバイド

04識別子

引用
RAG(Cytion カタログ番号 305190)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_3575

05発現と感受性

タンパク質の発現
腎特異的エステラーゼ-2(ES-2)

06取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
BALB/c