RAG

RAG-solulinja on BALB/c-hiirten munuaisten adenokarsinoomasta peräisin oleva 8-asaguaniinille vastustuskykyinen mutantti, joka ei palaudu. Tämä linja kehitettiin vuorottelemalla eläimestä kudosviljelmään siirtymisiä, jotta saatiin rikastettua kasvaimen aiheuttavaa populaatiota ja samalla eliminoitua normaalit stroomaaliset fibroblastit. RAG-soluilla on ameboidinen tai epitelioidinen morfologia, jossa on näkyviä sytoplasmaprosesseja, ja ne ovat resistenttejä hypoksantiini-guaniinifosforibosyylitransferaasista (HGPRT) riippuvaisille valintamenetelmille entsyymipuutoksensa vuoksi. Tämä resistenssi on helpottanut niiden käyttöä biokemiallisissa valintajärjestelmissä somaattisten solujen hybridisaatiokokeissa.

RAG-soluja käytetään laajalti somaattisten solujen fuusiotutkimusten vanhempien linjana, koska ne ovat yhteensopivia inaktivoitua Sendai-virusta käyttävien fuusiomenetelmien kanssa. Kun ne fuusioidaan muiden solulinjojen, kuten LM(TK-) tai WI-38:n, kanssa, hybridit säilyttävät merkkikromosomit ja osoittavat metabolisten puutosten biokemiallista komplementaarisuutta. Nämä hybridit ovat olleet tärkeitä geneettisten säätelyelementtien kartoittamisessa ja geenien ilmentymisen tutkimisessa, erityisesti munuaisiin liittyvien entsyymien, kuten ES-2:n esteraasin, osalta. RAG-hybridit tarjoavat tietoa sekä lajin sisäisestä että lajin sisäisestä kromosomierottelusta ja funktionaalisesta genomitiikasta.

Sen lisäksi, että RAG-solut ovat hybridisaatiotutkimuksissa, ne ovat toimineet mallina geeniekspression epigeneettisen säätelyn tutkimisessa. Hybridisoluissa, joissa on mukana RAG, esiintyy usein tiettyjen geneettisten ominaisuuksien häviämistä ja uudelleen ilmenemistä riippuen tiettyjen kromosomien säilymisestä tai häviämisestä. Tämä tekee RAG-solulinjasta arvokkaan välineen geneettisen säätelyn ja kromosomistabiilisuuden dynamiikan ymmärtämisessä kasvainsoluissa.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa