RAG

Клітинна лінія RAG - це незворотній мутант, стійкий до 8-азагуаніну, отриманий з аденокарциноми нирки мишей BALB/c. Ця лінія була розроблена шляхом почергового пасажу культури від тварини до тканини для збагачення пухлинної популяції з одночасним вилученням нормальних стромальних фібробластів. Клітини RAG мають морфологію від амебоїдної до епітеліоїдної з вираженими цитоплазматичними відростками і стійкі до методів селекції, залежних від гіпоксантин-гуанінфосфорибозилтрансферази (HGPRT), через їх ферментний дефіцит. Ця стійкість сприяла їх використанню в системах біохімічної селекції для експериментів з гібридизації соматичних клітин.

Клітини RAG широко використовуються як батьківські лінії в дослідженнях зі злиття соматичних клітин завдяки їх сумісності з процедурами злиття з використанням інактивованого вірусу Сендай. При злитті з іншими клітинними лініями, такими як LM(TK-) або WI-38, гібриди зберігають маркерні хромосоми і демонструють біохімічну комплементарність метаболічних дефіцитів. Ці гібриди відіграли важливу роль у картографуванні генетичних регуляторних елементів та вивченні експресії генів, зокрема, пов'язаних з нирками ферментів, таких як естераза ES-2. RAG-гібриди дають уявлення про між- та внутрішньовидову хромосомну сегрегацію та функціональну геноміку.

На додаток до своєї ролі в дослідженнях гібридизації, RAG-клітини слугують моделлю для вивчення епігенетичної регуляції експресії генів. Гібридні клітини за участю RAG часто демонструють вимирання та повторну експресію певних генетичних ознак, залежно від збереження або втрати певних хромосом. Це робить лінію клітин RAG цінним інструментом для розуміння динаміки генетичної регуляції та хромосомної стабільності в пухлинних клітинах.

37°C, 5% _CO2, волога атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

У Cytion ми відповідаємо за якість та життєздатність нашої продукції. Ми гарантуємо, що наші клітини будуть життєздатними на початку культивування протягом 60 днів після відвантаження з нашого заводу. Ми запевняємо, що всі матеріали відповідають специфікаціям, описаним у сертифікаті аналізу та/або паспорті продукту

Для отримання більш детальної інформації, будь ласка, зверніться до нашого <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Заяви про гарантію</a>