RAG

RAG-cellinjen är en icke-reverterande 8-azaguaninresistent mutant som härrör från ett renalt adenokarcinom hos BALB/c-möss. Denna linje utvecklades genom alternerande djur-till-vävnadsodlingspassager för att berika den tumörframkallande populationen samtidigt som normala stromala fibroblaster eliminerades. RAG-cellerna uppvisar en amöboid till epiteloid morfologi med framträdande cytoplasmatiska processer och är resistenta mot hypoxanthin-guanin-fosforibosyltransferas (HGPRT)-beroende selektionsmetoder på grund av sin enzymatiska brist. Denna resistens har underlättat deras användning i biokemiska selektionssystem för hybridiseringsexperiment med somatiska celler.

RAG-celler används ofta som föräldralinje i fusionsstudier med somatiska celler eftersom de är kompatibla med fusionsförfaranden med inaktiverat Sendai-virus. När de fusioneras med andra cellinjer, t.ex. LM(TK-) eller WI-38, behåller hybriderna markörkromosomer och uppvisar biokemisk komplementering av metaboliska brister. Dessa hybrider har varit avgörande för kartläggningen av genetiska regulatoriska element och för studier av genuttryck, särskilt i njurassocierade enzymer som ES-2-esteras. RAG-hybrider ger insikter i både inter- och intraspecifik kromosomal segregation och funktionell genomik.

Förutom sin roll i hybridiseringsstudier har RAG-celler fungerat som en modell för att studera den epigenetiska regleringen av genuttryck. Hybridceller med RAG uppvisar ofta utrotning och återuttryck av specifika genetiska egenskaper, beroende på om vissa kromosomer behålls eller förloras. Detta gör RAG-cellinjen till ett värdefullt verktyg för att förstå dynamiken i den genetiska regleringen och kromosomstabiliteten i tumörframkallande celler.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring