RAG

Bunková línia RAG je nereverzibilný mutant rezistentný na 8-azaguanín odvodený z adenokarcinómu obličky myší BALB/c. Táto línia bola vyvinutá prostredníctvom striedania pasáží medzi zvieratami a tkanivovými kultúrami s cieľom obohatiť nádorovú populáciu a zároveň eliminovať normálne stromálne fibroblasty. Bunky RAG vykazujú ameboidnú až epiteloidnú morfológiu s výraznými cytoplazmatickými výbežkami a sú rezistentné voči selektívnym metódam závislým od hypoxantín-guanínfosforibosyltransferázy (HGPRT) v dôsledku ich enzymatického deficitu. Táto rezistencia uľahčila ich použitie v biochemických selekčných systémoch pre experimenty s hybridizáciou somatických buniek.

Bunky RAG sa široko využívajú ako rodičovská línia v štúdiách fúzie somatických buniek vďaka ich kompatibilite s postupmi fúzie s použitím inaktivovaného vírusu Sendai. Pri fúzii s inými bunkovými líniami, ako sú LM(TK-) alebo WI-38, si hybridy zachovávajú markerové chromozómy a vykazujú biochemickú komplementáciu metabolických nedostatkov. Tieto hybridy boli nápomocné pri mapovaní genetických regulačných prvkov a štúdiu expresie génov, najmä enzýmov súvisiacich s obličkami, ako je esteráza ES-2. Hybridy RAG poskytujú poznatky o medzidruhovej aj vnútrodruhovej chromozómovej segregácii a funkčnej genomike.

Okrem ich úlohy v hybridizačných štúdiách slúžia bunky RAG ako model na štúdium epigenetickej regulácie expresie génov. Hybridné bunky zahŕňajúce RAG často vykazujú zánik a opätovnú expresiu špecifických genetických znakov v závislosti od zachovania alebo straty konkrétnych chromozómov. To robí z bunkovej línie RAG cenný nástroj na pochopenie dynamiky genetickej regulácie a chromozómovej stability v nádorových bunkách.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke