RAG

RAG rakuliin on BALB/c-hiirte neeru adenokartsinoomist saadud 8-azaguaniinile mittepöörduv mutant. See liin töötati välja vahelduvate loomade ja koekultuuride vaheliste läbikäikude abil, et rikastada kasvajalist populatsiooni, kõrvaldades samal ajal normaalsed stromaalsed fibroblastid. RAG-rakkudel on ameboidne kuni epitelioidne morfoloogia koos silmatorkavate tsütoplasma protsessidega ja nad on ensüümipuudulikkuse tõttu resistentsed hüpoksantiin-guaniinfosforibosüültransferaasist (HGPRT) sõltuvate selektsioonimeetodite suhtes. See resistentsus on hõlbustanud nende kasutamist biokeemilistes selektsioonisüsteemides somaatiliste rakkude hübridiseerimise katsetes.

RAG rakke kasutatakse laialdaselt vanemliinina somaatiliste rakkude fusiooniuuringutes, kuna need sobivad inaktiveeritud Sendai-viirust kasutavate fusiooniprotseduuridega. Fusiooniliinide, näiteks LM(TK-) või WI-38 rakuliinidega, säilitavad hübriidid markerkromosoomid ja näitavad biokeemilist komplementaarsust metaboolsete puudujääkide osas. Need hübriidid on olnud olulised geneetiliste regulatiivsete elementide kaardistamisel ja geeniekspressiooni uurimisel, eriti neerudega seotud ensüümide, nagu ES-2 esteraas, puhul. RAG-hübriidid annavad ülevaate nii inter- kui ka intraspetsiifilisest kromosoomide segregatsioonist ja funktsionaalsest genoomikast.

Lisaks nende rollile hübriiduuringutes on RAG-rakud olnud mudeliks geeniekspressiooni epigeneetilise regulatsiooni uurimisel. RAGiga seotud hübriidrakud näitavad sageli konkreetsete geneetiliste tunnuste väljasuremist ja taasväljendamist, sõltuvalt konkreetsete kromosoomide säilitamisest või kadumisest. See muudab RAG rakuliini väärtuslikuks vahendiks geneetilise regulatsiooni ja kromosoomide stabiilsuse dünaamika mõistmisel kasvajarakkudes.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest