RAG

RAG-cellelinjen er en ikke-reverterende 8-azaguaninresistent mutant, der stammer fra et renalt adenokarcinom fra BALB/c-mus. Denne linje blev udviklet gennem alternative dyr-til-vævskultur-passager for at berige den tumorigeniske population, mens normale stromale fibroblaster blev elimineret. RAG-celler har en amøbeformet til epithelioid morfologi med fremtrædende cytoplasmatiske processer og er resistente over for hypoxanthin-guanin-phosphoribosyltransferase (HGPRT)-afhængige selektionsmetoder på grund af deres enzymatiske mangel. Denne resistens har gjort det lettere at bruge dem i biokemiske selektionssystemer til somatiske cellehybridiseringseksperimenter.

RAG-celler bruges i vid udstrækning som forældrelinje i somatiske cellefusionsstudier på grund af deres kompatibilitet med fusionsprocedurer, der bruger inaktiveret Sendai-virus. Når de fusioneres med andre cellelinjer, såsom LM(TK-) eller WI-38, bevarer hybriderne markørkromosomer og udviser biokemisk komplementering af metaboliske mangler. Disse hybrider har været medvirkende til at kortlægge genetiske reguleringselementer og studere genekspression, især i nyreassocierede enzymer som ES-2-esterase. RAG-hybrider giver indsigt i både inter- og intraspecifik kromosomal segregering og funktionel genomik.

Ud over deres rolle i hybridiseringsstudier har RAG-celler fungeret som en model til at studere den epigenetiske regulering af genekspression. Hybridceller, der involverer RAG, viser ofte udryddelse og genudtryk af specifikke genetiske træk, afhængigt af fastholdelse eller tab af bestemte kromosomer. Det gør RAG-cellelinjen til et værdifuldt værktøj til at forstå dynamikken i den genetiske regulering og kromosomernes stabilitet i tumorigeniske celler.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasma-kontaminering udelukkes ved hjælp af både PCR-baserede assays og luminescensbaserede mycoplasma-detektionsmetoder.

For at sikre, at der ikke er nogen bakterie-, svampe- eller gærforurening, underkastes cellekulturerne daglige visuelle inspektioner.

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring