RAG

La linea cellulare RAG è un mutante non reversibile resistente all'8-azaguanina derivato da un adenocarcinoma renale di topi BALB/c. Questa linea è stata sviluppata attraverso passaggi alternati da animale a coltura tissutale per arricchire la popolazione tumorigenica ed eliminare i normali fibroblasti stromali. Le cellule RAG presentano una morfologia da ameboide a epitelioide con processi citoplasmatici prominenti e sono resistenti ai metodi di selezione dipendenti dall'ipoxantina-guanina fosforibosiltransferasi (HGPRT) a causa della loro carenza enzimatica. Questa resistenza ne ha facilitato l'uso nei sistemi di selezione biochimica per gli esperimenti di ibridazione di cellule somatiche.

Le cellule RAG sono ampiamente utilizzate come linea parentale negli studi di fusione di cellule somatiche grazie alla loro compatibilità con le procedure di fusione che utilizzano il virus Sendai inattivato. Quando vengono fuse con altre linee cellulari, come LM(TK-) o WI-38, gli ibridi mantengono i cromosomi marcatori e presentano una complementazione biochimica delle carenze metaboliche. Questi ibridi sono stati fondamentali per la mappatura degli elementi di regolazione genetica e per lo studio dell'espressione genica, in particolare degli enzimi associati ai reni, come l'esterasi ES-2. Gli ibridi RAG forniscono approfondimenti sulla segregazione cromosomica inter- e intraspecifica e sulla genomica funzionale.

Oltre al loro ruolo negli studi di ibridazione, le cellule RAG sono servite come modello per studiare la regolazione epigenetica dell'espressione genica. Le cellule ibride RAG spesso mostrano l'estinzione e la riespressione di specifici tratti genetici, a seconda della conservazione o della perdita di particolari cromosomi. Ciò rende la linea cellulare RAG uno strumento prezioso per comprendere le dinamiche della regolazione genetica e della stabilità cromosomica nelle cellule tumorigeniche.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia