RAG

RAG šūnu līnija ir neatgriezeniska 8-azaguanīna rezistenta mutanta, kas iegūta no BALB/c peļu nieru adenokarcinomas. Šī līnija tika izstrādāta, izmantojot pārmaiņus dzīvnieku un audu kultūru pasāžas, lai bagātinātu audzēja populāciju, vienlaikus izslēdzot normālos stromālos fibroblastus. RAG šūnām ir ameboīda līdz epitēlioīda morfoloģija ar izteiktiem citoplazmas procesiem, un tās ir rezistentas pret hipoksantīna-guanīna fosforibosiltransferāzes (HGPRT) atkarīgām selekcijas metodēm fermentu deficīta dēļ. Šī rezistence ir atvieglojusi to izmantošanu bioķīmiskās selekcijas sistēmās somatisko šūnu hibridizācijas eksperimentos.

RAG šūnas plaši izmanto kā vecāku līniju somatisko šūnu saplūšanas pētījumos, jo tās ir saderīgas ar saplūšanas procedūrām, kurās izmanto inaktivētu Sendai vīrusu. Ja tās saplūst ar citām šūnu līnijām, piemēram, LM(TK-) vai WI-38, hibrīdi saglabā marķieru hromosomas un uzrāda bioķīmisku papildinājumu metabolisma trūkumiem. Šie hibrīdi ir bijuši noderīgi ģenētisko regulējošo elementu kartēšanai un gēnu ekspresijas izpētei, jo īpaši ar nierēm saistīto enzīmu, piemēram, ES-2 esterāzes, pētījumiem. RAG hibrīdi sniedz ieskatu gan par hromosomu segregāciju starp sugām, gan starp sugām, gan funkcionālajā genomikā.

Papildus to nozīmei hibridizācijas pētījumos RAG šūnas ir kalpojušas kā modelis gēnu ekspresijas epiģenētiskās regulācijas izpētei. Hibrīdšūnās, kurās izmanto RAG, bieži vien novēro specifisku ģenētisko pazīmju izzušanu un atkārtotu ekspresiju atkarībā no konkrētu hromosomu saglabāšanas vai zaudēšanas. Tas padara RAG šūnu līniju par vērtīgu instrumentu, lai izprastu ģenētiskās regulācijas un hromosomu stabilitātes dinamiku audzēja šūnās.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu