RAG

Die RAG-Zelllinie ist eine nicht-reversible 8-Azaguanin-resistente Mutante, die aus einem Nierenadenokarzinom von BALB/c-Mäusen stammt. Diese Linie wurde durch abwechselnde Passagen von Tier zu Gewebekultur entwickelt, um die tumorigene Population anzureichern, während normale Stromafibroblasten eliminiert wurden. RAG-Zellen weisen eine ameboide bis epitheloide Morphologie mit ausgeprägten zytoplasmatischen Fortsätzen auf und sind aufgrund ihres Enzymmangels resistent gegen Hypoxanthin-Guanin-Phosphoribosyltransferase (HGPRT)-abhängige Selektionsmethoden. Diese Resistenz hat ihre Verwendung in biochemischen Selektionssystemen für Hybridisierungsexperimente mit somatischen Zellen erleichtert.

RAG-Zellen werden aufgrund ihrer Kompatibilität mit Fusionsverfahren unter Verwendung inaktivierter Sendai-Viren häufig als Elternlinie in somatischen Zellfusionsstudien verwendet. Wenn sie mit anderen Zelllinien wie LM(TK-) oder WI-38 fusioniert werden, behalten die Hybride Markerchromosomen und weisen eine biochemische Komplementierung von Stoffwechseldefekten auf. Diese Hybride haben sich bei der Kartierung genetischer Regulierungselemente und der Untersuchung der Genexpression als nützlich erwiesen, insbesondere bei nierenassoziierten Enzymen wie der ES-2-Esterase. RAG-Hybride bieten Einblicke in die inter- und intraspezifische chromosomale Segregation und die funktionelle Genomik.

Neben ihrer Rolle in Hybridisierungsstudien dienen RAG-Zellen auch als Modell für die Untersuchung der epigenetischen Regulierung der Genexpression. Hybridzellen, an denen RAG beteiligt ist, zeigen häufig das Aussterben und die erneute Expression bestimmter genetischer Merkmale, je nachdem, ob bestimmte Chromosomen erhalten bleiben oder verloren gehen. Dies macht die RAG-Zelllinie zu einem wertvollen Instrument für das Verständnis der Dynamik der Genregulation und der Chromosomenstabilität in tumorigenen Zellen.

37°C, 5%_CO2, befeuchtete Atmosphäre.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

Bei Cytion stehen wir hinter der Qualität und Lebensfähigkeit unserer Produkte. Wir garantieren, dass unsere Zellen zu Beginn der Kultur für 60 Tage nach dem Versand aus unseren Einrichtungen lebensfähig sind. Wir versichern, dass alle Materialien mit den im Analysezertifikat und/oder Produktblatt beschriebenen Spezifikationen übereinstimmen

Ausführliche Informationen finden Sie in unserer <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantieerklärung