RAG

Η κυτταρική σειρά RAG είναι μια μη αναστρέφουσα μετάλλαξη ανθεκτική στην 8-αζαγουανίνη που προέρχεται από νεφρικό αδενοκαρκίνωμα ποντικών BALB/c. Αυτή η σειρά αναπτύχθηκε μέσω εναλλασσόμενων διελεύσεων από ζώο σε καλλιέργεια ιστού για τον εμπλουτισμό του καρκινικού πληθυσμού, ενώ παράλληλα εξαλείφθηκαν οι φυσιολογικοί στρωματικοί ινοβλάστες. Τα κύτταρα RAG εμφανίζουν αμοιβάδα έως επιθηλιοειδή μορφολογία με προεξέχουσες κυτταροπλασματικές διεργασίες και είναι ανθεκτικά στις μεθόδους επιλογής που εξαρτώνται από την υποξανθίνη-γουανίνη φωσφοριβοσυλτρανσφεράση (HGPRT) λόγω της ενζυμικής τους ανεπάρκειας. Η ανθεκτικότητα αυτή διευκόλυνε τη χρήση τους σε βιοχημικά συστήματα επιλογής για πειράματα υβριδισμού σωματικών κυττάρων.

Τα κύτταρα RAG χρησιμοποιούνται ευρέως ως γονική σειρά σε μελέτες σύντηξης σωματικών κυττάρων λόγω της συμβατότητάς τους με διαδικασίες σύντηξης που χρησιμοποιούν αδρανοποιημένο ιό Sendai. Όταν συγχωνεύονται με άλλες κυτταρικές σειρές, όπως η LM(TK-) ή η WI-38, τα υβρίδια διατηρούν χρωμοσώματα-δείκτες και παρουσιάζουν βιοχημική συμπλήρωση μεταβολικών ελλείψεων. Αυτά τα υβρίδια έχουν συμβάλει στη χαρτογράφηση γενετικών ρυθμιστικών στοιχείων και στη μελέτη της γονιδιακής έκφρασης, ιδίως σε ένζυμα που σχετίζονται με τα νεφρά, όπως η εστεράση ES-2. Τα υβρίδια RAG παρέχουν πληροφορίες τόσο για τον δια- όσο και για τον ενδο-ειδικό χρωμοσωμικό διαχωρισμό και τη λειτουργική γονιδιωματική.

Εκτός από το ρόλο τους στις μελέτες υβριδισμού, τα κύτταρα RAG έχουν χρησιμεύσει ως μοντέλο για τη μελέτη της επιγενετικής ρύθμισης της γονιδιακής έκφρασης. Τα υβριδικά κύτταρα που περιλαμβάνουν RAG συχνά παρουσιάζουν εξαφάνιση και επανεκφραση συγκεκριμένων γενετικών χαρακτηριστικών, ανάλογα με τη διατήρηση ή την απώλεια συγκεκριμένων χρωμοσωμάτων. Αυτό καθιστά την κυτταρική σειρά RAG ένα πολύτιμο εργαλείο για την κατανόηση της δυναμικής της γενετικής ρύθμισης και της χρωμοσωμικής σταθερότητας σε καρκινικά κύτταρα.

37°C, 5%_CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

Στην Cytion, υποστηρίζουμε την ποιότητα και τη βιωσιμότητα των προϊόντων μας. Εγγυόμαστε ότι τα κύτταρά μας θα είναι βιώσιμα κατά την έναρξη της καλλιέργειας για 60 ημέρες μετά την αποστολή από τις εγκαταστάσεις μας. Διαβεβαιώνουμε ότι όλα τα υλικά συμμορφώνονται με τις προδιαγραφές που περιγράφονται στο Πιστοποιητικό Ανάλυσης ή/και στο Φύλλο Προϊόντος

Για πλήρεις λεπτομέρειες, ανατρέξτε στην <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Δήλωση εγγύησης