RAG

De RAG-cellijn is een niet-reverterende mutant die resistent is tegen 8-azaguanine en afkomstig is van een nieradenocarcinoom van BALB/c-muizen. Deze lijn werd ontwikkeld door afwisselende dier-tot-weefselkweek passages om de tumorigene populatie te verrijken terwijl normale stromale fibroblasten werden geëlimineerd. RAG-cellen vertonen een ameboïde tot epithelioïde morfologie met prominente cytoplasmatische processen en zijn resistent tegen hypoxanthine-guanine fosforibosyltransferase (HGPRT)-afhankelijke selectiemethoden vanwege hun enzymatische deficiëntie. Deze resistentie heeft hun gebruik in biochemische selectiesystemen voor somatische celhybridisatie-experimenten vergemakkelijkt.

RAG-cellen worden op grote schaal gebruikt als ouderlijn in somatische celfusiestudies vanwege hun compatibiliteit met fusieprocedures waarbij gebruik wordt gemaakt van geïnactiveerd Sendai-virus. Bij fusie met andere cellijnen, zoals LM(TK-) of WI-38, behouden de hybriden markerchromosomen en vertonen ze biochemische complementatie van metabolische tekortkomingen. Deze hybriden zijn belangrijk geweest bij het in kaart brengen van genetische regulerende elementen en het bestuderen van genexpressie, vooral in nier-geassocieerde enzymen zoals het ES-2 esterase. RAG hybriden geven inzicht in zowel inter- als intraspecifieke chromosomale segregatie en functionele genomica.

Naast hun rol in hybridisatiestudies hebben RAG cellen gediend als model om de epigenetische regulatie van genexpressie te bestuderen. Hybride cellen met RAG vertonen vaak extinctie en re-expressie van specifieke genetische eigenschappen, afhankelijk van het behoud of verlies van bepaalde chromosomen. Dit maakt de RAG cellijn een waardevol hulpmiddel om de dynamiek van genetische regulatie en chromosomale stabiliteit in tumorigene cellen te begrijpen.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring