RAG
Cell line · Nomor produk 305190
The RAG cell line is a nonreverting 8-azaguanine-resistant mutant derived from a renal adenocarcinoma of BALB/c mice. This line was developed through alte...
Penyesuaian / Rekomendasi
- RAGCell line€430.00
Direkomendasikan (stok terbaru)
01Informasi umum
- Deskripsi
Garis sel RAG adalah mutan resisten 8-azaguanin yang tidak dapat balik yang berasal dari adenokarsinoma ginjal tikus BALB/c. Jalur ini dikembangkan melalui jalur kultur hewan-ke-jaringan alternatif untuk memperkaya populasi tumorigenik sambil menghilangkan fibroblas stroma normal. Sel RAG menunjukkan morfologi ameboid hingga epiteloid dengan proses sitoplasma yang menonjol dan resisten terhadap metode seleksi yang bergantung pada hipoksantin-guanin fosforibosiltransferase (HGPRT) karena defisiensi enzimatiknya. Resistensi ini telah memfasilitasi penggunaannya dalam sistem seleksi biokimia untuk eksperimen hibridisasi sel somatik.
Sel RAG banyak digunakan sebagai garis induk dalam studi fusi sel somatik karena kompatibilitasnya dengan prosedur fusi menggunakan virus Sendai yang tidak aktif. Ketika digabungkan dengan garis sel lain, seperti LM (TK-) atau WI-38, hibrida mempertahankan kromosom penanda dan menunjukkan komplementasi biokimiawi dari kekurangan metabolisme. Hibrida ini telah berperan penting dalam memetakan elemen pengaturan genetik dan mempelajari ekspresi gen, terutama pada enzim yang terkait dengan ginjal seperti ES-2 esterase. Hibrida RAG memberikan wawasan tentang pemisahan kromosom inter dan intraspesifik serta genomik fungsional.
Selain perannya dalam studi hibridisasi, sel RAG telah berfungsi sebagai model untuk mempelajari regulasi epigenetik ekspresi gen. Sel hibrida yang melibatkan RAG sering menunjukkan kepunahan dan ekspresi ulang sifat genetik tertentu, tergantung pada retensi atau hilangnya kromosom tertentu. Hal ini menjadikan garis sel RAG sebagai alat yang berharga dalam memahami dinamika regulasi genetik dan stabilitas kromosom dalam sel tumorigenik.
- Tisu
- Ginjal
- Penyakit
- Karsinoma ginjal tikus
- Sinonim
- Rag
02Klasifikasi
- Organisme
- Tikus
- Sifat-sifat pertumbuhan
- Pengikut
- Tingkat keamanan hayati
- 1
03Karakteristik
- Morfologi
- Amoeboid
04Pengidentifikasi
- Referensi
- RAG (nomor katalog Cytion 305190)
- Nomor Identifikasi Pajak NCBI
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_3575
05Ekspresi dan kerentanan
- Ekspresi protein
- Esterase spesifik ginjal-2 (ES-2)
06Penanganan dan budidaya
- Media kultur
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
- Suasana inkubasi
37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.
- Suplemen
- Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
- Reagen disosiasi
- Accutase
- Perbanyakan sel
- Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
- Pergantian cairan
- 2 hingga 3 kali per minggu
- Pencairan dan pembiakan
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Pengendalian mutu dan kriopreservasi
- Kemandulan
Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.
Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.
- Media pembekuan
- Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
- Kondisi penyimpanan
Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.
- Ketentuan pengiriman
Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.
08Donatur
- Jenis / subspesies
- BALB/c
09Hukum dan keselamatan
- Tindakan pencegahan keselamatan
- Ketika berencana menyimpan kriovial dalam nitrogen cair untuk pencairan di masa mendatang, Anda wajib mematuhi langkah-langkah keamanan yang ketat. Sarung tangan dan pakaian pelindung yang tepat sangat penting, dan penggunaan masker wajah atau kacamata pengaman diperlukan selama pemindahan sampel beku ke atau dari tangki nitrogen cair. Hal ini untuk mengurangi risiko cedera akibat potensi ledakan cryovial pada saat pemindahan, yang dapat mengakibatkan proyeksi fragmen tajam.
- Garansi
Di Cytion, kami mendukung kualitas dan kelangsungan hidup produk kami. Kami menjamin bahwa sel kami akan dapat bertahan hidup pada awal kultur selama 60 hari setelah pengiriman dari fasilitas kami. Kami menjamin bahwa semua bahan sesuai dengan spesifikasi yang dijelaskan dalam Sertifikat Analisis dan / atau Lembar Produk
Untuk detail lengkap, silakan merujuk ke <a href=""/Siapa-kami-Garansi/Garansi/"" hreflang=""x-default"">Pernyataan Jaminan kami
- Diperlukan Perjanjian Transfer Material
- Ya