RAG

Dòng tế bào RAG là một đột biến không hồi phục kháng 8-azaguanine, được phân lập từ khối u tuyến thận của chuột BALB/c. Dòng tế bào này được phát triển thông qua các chu kỳ chuyển đổi từ động vật sang nuôi cấy mô để tăng cường dân số tế bào gây u trong khi loại bỏ các tế bào sợi mô liên kết bình thường. Tế bào RAG có hình thái từ dạng amip đến dạng biểu mô, với các quá trình tế bào chất nổi bật và kháng lại các phương pháp chọn lọc phụ thuộc vào hypoxanthine-guanine phosphoribosyltransferase (HGPRT) do thiếu hụt enzym. Sự kháng này đã tạo điều kiện thuận lợi cho việc sử dụng chúng trong các hệ thống chọn lọc sinh hóa cho các thí nghiệm lai ghép tế bào soma.

Tế bào RAG được sử dụng rộng rãi như dòng tế bào cha trong các nghiên cứu lai ghép tế bào soma do tính tương thích của chúng với các quy trình lai ghép sử dụng virus Sendai đã được bất hoạt. Khi được hợp nhất với các dòng tế bào khác, như LM(TK-) hoặc WI-38, các tế bào lai giữ lại các nhiễm sắc thể đánh dấu và thể hiện sự bù đắp sinh hóa cho các thiếu hụt chuyển hóa. Các tế bào lai này đã đóng vai trò quan trọng trong việc lập bản đồ các yếu tố điều hòa di truyền và nghiên cứu biểu hiện gen, đặc biệt là trong các enzym liên quan đến thận như enzym esterase ES-2. Các tế bào lai RAG cung cấp thông tin về cả sự phân ly nhiễm sắc thể giữa các loài và trong cùng loài, cũng như về di truyền học chức năng.

Ngoài vai trò trong các nghiên cứu lai tạo, các tế bào RAG còn được sử dụng làm mô hình để nghiên cứu điều hòa biểu hiện gen thông qua cơ chế di truyền học. Các tế bào lai liên quan đến RAG thường thể hiện sự biến mất và tái biểu hiện của các đặc tính di truyền cụ thể, tùy thuộc vào việc giữ lại hoặc mất đi các nhiễm sắc thể cụ thể. Điều này khiến dòng tế bào RAG trở thành công cụ quý giá trong việc hiểu rõ động lực học của điều hòa di truyền và sự ổn định nhiễm sắc thể trong các tế bào gây ung thư.

37°C, 5%_CO₂, môi trường ẩm.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Sự nhiễm khuẩn Mycoplasma được loại trừ bằng cả các phương pháp xét nghiệm dựa trên PCR và các phương pháp phát hiện Mycoplasma dựa trên phát quang.

Để đảm bảo không có nhiễm khuẩn vi khuẩn, nấm hoặc men, các mẫu nuôi cấy tế bào được kiểm tra trực quan hàng ngày.

Để bảo quản lâu dài, hãy đặt ống nghiệm vào nitơ lỏng ở pha hơi ở nhiệt độ khoảng −150 đến −196 °C. Việc bảo quản ở −80 °C chỉ được chấp nhận như một bước trung gian ngắn hạn trước khi chuyển sang nitơ lỏng.

Các dòng tế bào được bảo quản bằng phương pháp đông lạnh được vận chuyển trên đá khô trong bao bì cách nhiệt đã được kiểm định, kèm theo lượng chất làm lạnh đủ để duy trì nhiệt độ khoảng −78 °C trong suốt quá trình vận chuyển. Khi nhận hàng, hãy kiểm tra ngay lập tức bao bì và chuyển các ống nghiệm sang nơi lưu trữ phù hợp mà không chậm trễ.

Tại Cytion, chúng tôi cam kết về chất lượng và khả năng sống của các sản phẩm của mình. Chúng tôi đảm bảo rằng các tế bào của chúng tôi sẽ có khả năng sống tại thời điểm bắt đầu nuôi cấy trong 60 ngày kể từ khi vận chuyển từ cơ sở của chúng tôi. Chúng tôi cam kết rằng tất cả các vật liệu tuân thủ các thông số kỹ thuật được mô tả trong Giấy chứng nhận phân tích và/hoặc Tài liệu sản phẩm.

Để biết chi tiết đầy đủ, vui lòng tham khảo <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Tuyên bố Bảo hành.