RAG

RAG-cellelinjen er en ikke-reverterende 8-azaguaninresistent mutant avledet fra et renalt adenokarsinom fra BALB/c-mus. Denne linjen ble utviklet ved hjelp av vekslende dyr-til-vevskultur-passasjer for å anrike den tumorigeniske populasjonen, samtidig som normale stromale fibroblaster ble eliminert. RAG-celler har en ameboid til epiteloid morfologi med fremtredende cytoplasmatiske prosesser og er resistente mot hypoksantin-guanin-fosforibosyltransferase (HGPRT)-avhengige seleksjonsmetoder på grunn av enzymatisk mangel. Denne resistensen har gjort det lettere å bruke dem i biokjemiske seleksjonssystemer for somatiske cellehybridiseringseksperimenter.

RAG-celler er mye brukt som foreldrelinje i somatiske cellefusjonsstudier fordi de er kompatible med fusjonsprosedyrer der inaktivert Sendai-virus brukes. Når de fusjoneres med andre cellelinjer, som LM(TK-) eller WI-38, beholder hybridene markørkromosomer og viser biokjemisk komplementering av metabolske mangler. Disse hybridene har vært avgjørende for å kartlegge genetiske reguleringselementer og studere genuttrykk, særlig i nyreassosierte enzymer som ES-2-esterase. RAG-hybrider gir innsikt i både inter- og intraspesifikk kromosomal segregering og funksjonell genomikk.

I tillegg til sin rolle i hybridiseringsstudier har RAG-celler fungert som en modell for å studere epigenetisk regulering av genuttrykk. Hybridceller som involverer RAG, viser ofte utryddelse og reekspresjon av spesifikke genetiske egenskaper, avhengig av om bestemte kromosomer beholdes eller går tapt. Dette gjør RAG-cellelinjen til et verdifullt verktøy for å forstå dynamikken i genetisk regulering og kromosomstabilitet i tumorogene celler.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring