RAG

A RAG sejtvonal egy nem revertálódó 8-azaguanin-rezisztens mutáns, amely BALB/c egerek vese adenokarcinómájából származik. Ezt a vonalat váltakozó állat-szövetkultúra passzázsok révén fejlesztették ki, hogy a tumorigén populációt dúsítsák, miközben a normális stromális fibroblasztokat eliminálják. A RAG sejtek ameboid vagy epithelioid morfológiát mutatnak, kiemelkedő citoplazmatikus folyamatokkal, és enzimhiányuk miatt rezisztensek a hipoxantin-guanin-foszforibozil-transzferáz (HGPRT) szelekciós módszerekkel szemben. Ez a rezisztencia megkönnyítette a szomatikus sejthibridizációs kísérletek biokémiai szelekciós rendszereiben való felhasználásukat.

A RAG sejteket széles körben használják szülői vonalként a szomatikus sejtfúziós vizsgálatokban, mivel kompatibilisek az inaktivált Sendai-vírust használó fúziós eljárásokkal. Más sejtvonalakkal, például LM(TK-) vagy WI-38 sejtvonallal történő fúzió esetén a hibridek megtartják a marker kromoszómákat és biokémiai komplementer anyagcsere-hiányosságokat mutatnak. Ezek a hibridek fontos szerepet játszottak a genetikai szabályozó elemek feltérképezésében és a génexpresszió tanulmányozásában, különösen a veséhez kapcsolódó enzimek, például az ES-2 esteráz esetében. A RAG hibridek betekintést nyújtanak mind az inter-, mind az intraspecifikus kromoszómális szegregációba és a funkcionális genomikába.

A hibridizációs vizsgálatokban betöltött szerepük mellett a RAG sejtek modellként szolgáltak a génexpresszió epigenetikai szabályozásának tanulmányozására. A RAG-ot magában foglaló hibrid sejtek gyakran mutatják bizonyos genetikai tulajdonságok kihalását és újrakifejeződését, az egyes kromoszómák megtartásától vagy elvesztésétől függően. Ez teszi a RAG sejtvonalat értékes eszközzé a genetikai szabályozás és a kromoszómális stabilitás dinamikájának megértésében a tumorigén sejtekben.

37°C, 5%_CO2, párásított légkör.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak

A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban