RBL-2H3

La lignée cellulaire RBL-2H3 est devenue un outil précieux pour l'étude de la physiologie des mastocytes. Les cellules RBL-2H3 expriment la protéase II des mastocytes de rat (RMCP-II) et le récepteur tyrosine kinase c-kit, ce qui en fait un modèle potentiel pour les mastocytes. Cependant, des données contradictoires et parfois trompeuses ont été rapportées sur les cellules RBL-2H3.

Les cellules RBL-2H3 ont été largement utilisées pour étudier divers aspects de la fonction des mastocytes, notamment la dégranulation, les stabilisateurs de mastocytes et l'interaction des récepteurs FceRI avec le cytosquelette. Ils expriment des récepteurs IgE de haute affinité et peuvent être activés pour sécréter de l'histamine et d'autres médiateurs. La culture des cellules RBL-2H3 est relativement facile, et des temps de culture plus longs permettent d'obtenir une densité cellulaire plus élevée.

La dégranulation est une caractéristique clé des cellules RBL-2H3, similaire à celle des mastocytes et des basophiles. Lorsque les allergènes réticulent leurs récepteurs FceRI liés aux IgE, les cellules RBL-2H3 libèrent des médiateurs préformés et nouvellement synthétisés, contribuant ainsi aux réponses immunitaires allergiques. La dégranulation des cellules RBL-2H3 a également permis de mieux comprendre la dégranulation des basophiles. Ces cellules peuvent également dégranuler en réponse à des stimuli non immunologiques, et il existe des différences entre MMC, RBL-2H3 et CTMC.
Le rôle du calcium dans la dégranulation des cellules RBL-2H3 est important. L'ionophore calcique A23187, qui augmente les niveaux de calcium intracellulaire, induit une dégranulation dans les cellules RBL-2H3, similaire à celle des mastocytes et des basophiles. Certaines études ont décrit les cellules RBL-2H3 comme une lignée cellulaire libérant de la sérotonine.

37°C, 5%_CO2, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes basées sur la luminescence.

Pour s'assurer de l'absence de contamination bactérienne, fongique ou levurienne, les cultures cellulaires font l'objet d'inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placer les flacons dans de l'azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre -150 et -196 °C environ. Le stockage à -80 °C n'est acceptable qu'en tant qu'étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l'azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées sur glace sèche dans des emballages isolés et validés, avec suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d'environ -78 °C tout au long du transport. À la réception, inspecter immédiatement le conteneur et transférer sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous nous portons garants de la qualité et de la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours après l'expédition de nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d'analyse et/ou la fiche produit

Pour plus de détails, veuillez consulter notre <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default""> Déclaration de garantie