RBL-2H3

La linea cellulare RBL-2H3 è diventata uno strumento prezioso per lo studio della fisiologia dei mastociti. Le cellule RBL-2H3 esprimono la proteasi II dei mastociti di ratto (RMCP-II) e il recettore tirosin-chinasi c-kit, che le rende un potenziale modello di mastociti. Tuttavia, sono stati riportati dati contrastanti e talvolta fuorvianti sulle cellule RBL-2H3.

Le cellule RBL-2H3 sono state ampiamente utilizzate per studiare vari aspetti della funzione dei mastociti, tra cui la degranulazione, gli stabilizzatori dei mastociti e l'interazione dei recettori FceRI con il citoscheletro. Esprimono recettori IgE ad alta affinità e possono essere attivati per secernere istamina e altri mediatori. La coltivazione delle cellule RBL-2H3 è relativamente semplice e i tempi di coltura più lunghi consentono di ottenere una maggiore densità cellulare.

La degranulazione è una caratteristica fondamentale delle cellule RBL-2H3, simile ai mastociti e ai basofili. Quando gli allergeni reticolano i loro recettori FceRI legati alle IgE, le cellule RBL-2H3 rilasciano mediatori preformati e di nuova sintesi, contribuendo alle risposte immunitarie allergiche. La degranulazione delle cellule RBL-2H3 ha fornito indicazioni anche sulla degranulazione dei basofili. Queste cellule possono anche subire una degranulazione in risposta a stimoli non immunologici e vi sono differenze tra MMC, RBL-2H3 e CTMC.
Il ruolo del calcio nella degranulazione delle cellule RBL-2H3 è significativo. Lo ionoforo di calcio A23187, che aumenta i livelli di calcio intracellulare, induce la degranulazione nelle cellule RBL-2H3, analogamente ai mastociti e ai basofili. Alcuni studi hanno descritto le cellule RBL-2H3 come una linea cellulare che rilascia serotonina.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia