RBL-2H3

A linha celular RBL-2H3 tornou-se um instrumento valioso para o estudo da fisiologia dos mastócitos. As células RBL-2H3 expressam a protease II dos mastócitos de rato (RMCP-II) e a tirosina quinase do recetor c-kit, o que as torna um modelo potencial para os mastócitos. No entanto, foram registados dados contraditórios e por vezes enganadores sobre as células RBL-2H3.

As células RBL-2H3 têm sido amplamente utilizadas para investigar vários aspectos da função dos mastócitos, incluindo a desgranulação, os estabilizadores de mastócitos e a interação dos receptores FceRI com o citoesqueleto. Expressam receptores IgE de alta afinidade e podem ser activados para segregar histamina e outros mediadores. A cultura de células RBL-2H3 é relativamente fácil e tempos de cultura mais longos resultam numa maior densidade celular.

A desgranulação é uma caraterística essencial das células RBL-2H3, semelhante à dos mastócitos e basófilos. Quando os alergénios se ligam aos seus receptores FceRI ligados à IgE, as células RBL-2H3 libertam mediadores pré-formados e recém-sintetizados, contribuindo para as respostas alérgicas imunitárias. A degranulação das células RBL-2H3 também forneceu informações sobre a degranulação dos basófilos. Estas células também podem sofrer degranulação em resposta a estímulos não imunológicos, e existem diferenças entre MMC, RBL-2H3 e CTMC.
O papel do cálcio na degranulação das células RBL-2H3 é significativo. O ionóforo de cálcio A23187, que aumenta os níveis de cálcio intracelular, induz a desgranulação das células RBL-2H3, à semelhança dos mastócitos e dos basófilos. Alguns estudos descreveram as células RBL-2H3 como uma linha de células libertadoras de serotonina.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia