Pereiti prie turinio
RBL-2H3
Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Žiurkių leukemija
Sinonimai
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Dokumentai

RBL-2H3

Cell line · Prekės numeris 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų

Pritaikymas / Rekomendacijos

Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

RBL-2H3 ląstelių linija tapo vertingu įrankiu tiriant putliųjų ląstelių fiziologiją. RBL-2H3 ląstelės ekspresuoja žiurkių putliųjų ląstelių proteazę II (RMCP-II) ir c-kit receptorių tirozinkinazę, todėl jos gali būti putliųjų ląstelių modelis. Tačiau apie RBL-2H3 ląsteles buvo pateikta prieštaringų ir kartais klaidinančių duomenų.

RBL-2H3 ląstelės plačiai naudojamos įvairiems putliųjų ląstelių funkcijos aspektams, įskaitant degranuliaciją, putliųjų ląstelių stabilizatorius ir FceRI receptorių sąveiką su citoskeletu, tirti. Jos ekspresuoja didelio afiniteto IgE receptorius ir gali būti aktyvuotos išskirti histaminą ir kitus mediatorius. Auginti RBL-2H3 ląsteles yra palyginti lengva, o ilgesnis auginimo laikas lemia didesnį ląstelių tankį.

RBL-2H3 ląstelėms, panašiai kaip ir putliosioms ląstelėms bei bazofilams, būdinga degranuliacija. Kai alergenai susieja jų IgE surištus FceRI receptorius, RBL-2H3 ląstelės išskiria iš anksto paruoštus ir naujai susintetintus mediatorius, kurie prisideda prie imuninių alerginių reakcijų. RBL-2H3 ląstelių degranuliacija leido suprasti ir bazofilų degranuliaciją. Šios ląstelės taip pat gali degranuliuoti reaguodamos į neimunologinius dirgiklius, o MMC, RBL-2H3 ir CTMC skiriasi.
Kalcio vaidmuo RBL-2H3 ląstelių degranuliacijai yra reikšmingas. Kalcio jonoforas A23187, didinantis viduląstelinį kalcio kiekį, sukelia RBL-2H3 ląstelių degranuliaciją, panašiai kaip putliųjų ląstelių ir bazofilų. Kai kuriuose tyrimuose RBL-2H3 ląstelės apibūdinamos kaip serotoniną atpalaiduojančių ląstelių linija.

Audinys
Periferinis kraujas
Liga
Žiurkių leukemija
Sinonimai
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Klasifikacija

Organizmas
Žiurkė
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
1

03Charakteristikos

Morfologija
Fibroblastai

04Identifikatoriai

Nuoroda
RBL-2H3 (Cytion katalogo numeris 305194)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutaminas, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion gaminio numeris 820100a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS ir 1 % NEAA
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Skysčių atnaujinimas
2-3 kartus per savaitę
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

07Donoras

Veislė / porūšis
Wistar