RBL-2H3
Cell line · Produktnummer 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
Anpassning / Rekommendationer
- RBL-2H3Cell line€430.00
Rekommenderat (det färskaste partiet)
01Allmän information
- Beskrivning
Cellinjen RBL-2H3 har blivit ett värdefullt verktyg för att studera mastcellsfysiologi. RBL-2H3-celler uttrycker rat mast cell protease II (RMCP-II) och receptortyrosinkinaset c-kit, vilket gör dem till en potentiell modell för mastceller. Motstridiga och ibland vilseledande uppgifter om RBL-2H3-celler har dock rapporterats.
RBL-2H3-celler har använts i stor utsträckning för att undersöka olika aspekter av mastcellsfunktionen, bland annat degranulering, mastcellsstabilisatorer och FceRI-receptorernas interaktion med cytoskelettet. De uttrycker IgE-receptorer med hög affinitet och kan aktiveras för att utsöndra histamin och andra mediatorer. Det är relativt enkelt att odla RBL-2H3-celler, och längre odlingstider ger högre celldensitet.
Degranulering är en viktig egenskap hos RBL-2H3-celler, i likhet med mastceller och basofiler. När allergener korslänkar deras IgE-bundna FceRI-receptorer frigör RBL-2H3-cellerna förformade och nysyntetiserade mediatorer, vilket bidrar till allergiska immunsvar. Degranuleringen av RBL-2H3-celler har också gett insikter om basofilernas degranulering. Dessa celler kan också genomgå degranulering som svar på icke-immunologiska stimuli, och det finns skillnader mellan MMC, RBL-2H3 och CTMC.
Kalcium spelar en viktig roll i degranuleringen av RBL-2H3-celler. Kalciumjonforen A23187, som ökar de intracellulära kalciumnivåerna, inducerar degranulering i RBL-2H3-celler, på samma sätt som mastceller och basofiler. I vissa studier har RBL-2H3-celler beskrivits som en serotoninfrisättande cellinje.- Vävnad
- Perifert blod
- Sjukdom
- Leukemi hos råtta
- Synonymer
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Klassificering
- Organism
- Råtta
- Tillväxtegenskaper
- Följsam
- Biosäkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Fibroblast
04Identifierare
- Källa
- RBL-2H3 (Cytion katalognummer 305194)
- NCBI-skattenummer
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Hantering och odling
- Odlingsmedium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
- Inkubationsatmosfär
37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.
- Kosttillskott
- Komplettera mediet med 10% FBS och 1% NEAA
- Dissociationsmedel
- Accutase
- Vidareodling
- Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
- Vätskeförnyelse
- 2 till 3 gånger per vecka
- Upptining och odling
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll och kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.
För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.
- Frysmedel
- Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
- Förvaringsförhållanden
För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.
- Leveransvillkor
Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.
07Donator
- Ras / underart
- Wistar
08Juridiska frågor och säkerhet
- Säkerhetsföreskrifter
- När man planerar att förvara en kryovial i flytande kväve för framtida upptining är det obligatoriskt att följa strikta säkerhetsåtgärder. Lämpliga skyddshandskar och skyddskläder är nödvändiga, och ansiktsmask eller skyddsglasögon måste användas vid överföring av frysta prover till eller från tanken med flytande kväve. Detta för att minska risken för skador på grund av eventuella explosioner i frysbehållaren vid borttagning, vilket kan leda till att vassa fragment projiceras.
- Garanti
På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet
För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring
- Avtal om materialöverföring krävs
- Ja