
- Szövet
- Perifériás vér
- Betegség
- Patkány leukémia
- Szinonimák
- RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3
Dokumentumok
RBL-2H3
Cell line · Termékszám 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
Személyre szabás / Ajánlások
- RBL-2H3Cell line€430.00
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
01Általános információk
- Leírás
Az RBL-2H3 sejtvonal értékes eszközzé vált a hízósejtek fiziológiájának tanulmányozására. Az RBL-2H3 sejtek patkány hízósejt proteáz II-t (RMCP-II) és a c-kit receptor tirozinkinázt expresszálják, így a hízósejtek potenciális modelljévé válnak. Az RBL-2H3 sejtekről azonban ellentmondásos és néha félrevezető adatokról számoltak be.
Az RBL-2H3 sejteket széles körben használták a hízósejtek működésének különböző aspektusainak vizsgálatára, beleértve a degranulációt, a hízósejt-stabilizátorokat és az FceRI receptorok és a citoszkeleton kölcsönhatását. Nagy affinitású IgE-receptorokat expresszálnak, és aktiválhatók hisztamin és más mediátorok szekréciójára. Az RBL-2H3 sejtek tenyésztése viszonylag egyszerű, és a hosszabb tenyésztési idő nagyobb sejtsűrűséget eredményez.
A degranuláció az RBL-2H3 sejtek egyik fő jellemzője, hasonlóan a hízósejtekhez és a bazofilokhoz. Amikor az allergének keresztkötik IgE-hez kötött FceRI-receptoraikat, az RBL-2H3 sejtek előre kialakított és újonnan szintetizált mediátorokat szabadítanak fel, hozzájárulva az immunallergiás válaszhoz. Az RBL-2H3 sejtek degranulációja betekintést nyújtott a bazofil degranulációba is. Ezek a sejtek nem immunológiai ingerek hatására is degranulálódhatnak, és különbségek vannak az MMC, az RBL-2H3 és a CTMC között.
A kalcium szerepe az RBL-2H3 sejtek degranulációjában jelentős. Az intracelluláris kalciumszintet növelő A23187 kalciumionofór az RBL-2H3 sejtekben a hízósejtekhez és a bazofilokhoz hasonlóan degranulációt indukál. Egyes tanulmányok az RBL-2H3 sejteket szerotonin-felszabadító sejtvonalként írták le.- Szövet
- Perifériás vér
- Betegség
- Patkány leukémia
- Szinonimák
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Osztályozás
- Organizmus
- Patkány
- Növekedési tulajdonságok
- Hűséges
- Biológiai biztonsági szint
- 1
03Jellemzők
- Morfológia
- Fibroblasztok
04Azonosítók
- Hivatkozás
- RBL-2H3 (Cytion katalógusszám: 305194)
- NCBI adóazonosító szám
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Kezelés és tenyésztés
- Táptalaj
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
- Inkubációs környezet
37°C, 5%CO2, párásított légkör.
- Kiegészítők
- A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
- Diszociációs reagens
- Accutase
- Átültetés
- Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
- Folyadékcsere
- hetente 2-3 alkalommal
- Felolvasztás és tenyésztés
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás
- Meddőség
A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.
A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.
- Fagyasztóközeg
- Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
- Tárolási feltételek
Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.
- Szállítási feltételek
A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.
07Adományozó
- Faj / alfaj
- Wistar
08Jogi és biztonsági információk
- Biztonsági óvintézkedések
- Ha egy kriovialitást folyékony nitrogénben tervezünk tárolni a későbbi kiolvasztás céljából, akkor kötelező betartani a szigorú biztonsági intézkedéseket. A megfelelő védőkesztyű és védőruházat elengedhetetlen, és a fagyasztott minták folyékony nitrogéntartályba vagy a folyékony nitrogéntartályból történő átvitele során arcmaszk vagy védőszemüveg használata szükséges. Ez azért van, hogy csökkentsék a kriovialis anyagok eltávolításakor bekövetkező esetleges robbanásból eredő sérülésveszélyt, amely éles szilánkok kilövellését eredményezheti.
- Garancia
A Cytionnál kiállunk termékeink minősége és életképessége mellett. Garantáljuk, hogy sejtjeink a tenyésztés megkezdésekor életképesek lesznek, a létesítményünkből történő kiszállítás után 60 napig. Biztosítjuk, hogy minden anyag megfelel az analitikai tanúsítványban és/vagy a terméklapon leírt specifikációknak
A teljes részleteket lásd <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Garancia nyilatkozatunkban
- Anyagátadási megállapodás szükséges
- Igen