Tartalomra ugrás
RBL-2H3
Szövet
Perifériás vér
Betegség
Patkány leukémia
Szinonimák
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Dokumentumok

RBL-2H3

Cell line · Termékszám 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00adó és szállítási költség nélkül

Személyre szabás / Ajánlások

Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
  • CoA
1

01Általános információk

Leírás

Az RBL-2H3 sejtvonal értékes eszközzé vált a hízósejtek fiziológiájának tanulmányozására. Az RBL-2H3 sejtek patkány hízósejt proteáz II-t (RMCP-II) és a c-kit receptor tirozinkinázt expresszálják, így a hízósejtek potenciális modelljévé válnak. Az RBL-2H3 sejtekről azonban ellentmondásos és néha félrevezető adatokról számoltak be.

Az RBL-2H3 sejteket széles körben használták a hízósejtek működésének különböző aspektusainak vizsgálatára, beleértve a degranulációt, a hízósejt-stabilizátorokat és az FceRI receptorok és a citoszkeleton kölcsönhatását. Nagy affinitású IgE-receptorokat expresszálnak, és aktiválhatók hisztamin és más mediátorok szekréciójára. Az RBL-2H3 sejtek tenyésztése viszonylag egyszerű, és a hosszabb tenyésztési idő nagyobb sejtsűrűséget eredményez.

A degranuláció az RBL-2H3 sejtek egyik fő jellemzője, hasonlóan a hízósejtekhez és a bazofilokhoz. Amikor az allergének keresztkötik IgE-hez kötött FceRI-receptoraikat, az RBL-2H3 sejtek előre kialakított és újonnan szintetizált mediátorokat szabadítanak fel, hozzájárulva az immunallergiás válaszhoz. Az RBL-2H3 sejtek degranulációja betekintést nyújtott a bazofil degranulációba is. Ezek a sejtek nem immunológiai ingerek hatására is degranulálódhatnak, és különbségek vannak az MMC, az RBL-2H3 és a CTMC között.
A kalcium szerepe az RBL-2H3 sejtek degranulációjában jelentős. Az intracelluláris kalciumszintet növelő A23187 kalciumionofór az RBL-2H3 sejtekben a hízósejtekhez és a bazofilokhoz hasonlóan degranulációt indukál. Egyes tanulmányok az RBL-2H3 sejteket szerotonin-felszabadító sejtvonalként írták le.

Szövet
Perifériás vér
Betegség
Patkány leukémia
Szinonimák
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Osztályozás

Organizmus
Patkány
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Fibroblasztok

04Azonosítók

Hivatkozás
RBL-2H3 (Cytion katalógusszám: 305194)
NCBI adóazonosító szám
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion cikkszám: 820100a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt 10% FBS-szel és 1% NEAA-val kell kiegészíteni
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

07Adományozó

Faj / alfaj
Wistar