
- Chusteczka
- Krew obwodowa
- Choroba
- Białaczka szczurów
- Synonimy
- RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3
Dokumenty
RBL-2H3
Cell line · Numer produktu 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
Dostosowanie / Zalecenia
- RBL-2H3Cell line€430.00
Polecane (najświeższa partia)
01Informacje ogólne
- Opis
Linia komórkowa RBL-2H3 stała się cennym narzędziem do badania fizjologii komórek tucznych. Komórki RBL-2H3 wykazują ekspresję proteazy szczurzych komórek tucznych II (RMCP-II) i kinazy tyrozynowej receptora c-kit, co czyni je potencjalnym modelem komórek tucznych. Zgłoszono jednak sprzeczne i czasami mylące dane dotyczące komórek RBL-2H3.
Komórki RBL-2H3 były szeroko stosowane do badania różnych aspektów funkcji komórek tucznych, w tym degranulacji, stabilizatorów komórek tucznych i interakcji receptorów FceRI z cytoszkieletem. Wyrażają one receptory IgE o wysokim powinowactwie i mogą być aktywowane do wydzielania histaminy i innych mediatorów. Hodowla komórek RBL-2H3 jest stosunkowo łatwa, a dłuższy czas hodowli skutkuje większą gęstością komórek.
Degranulacja jest kluczową cechą komórek RBL-2H3, podobną do komórek tucznych i bazofilów. Gdy alergeny sieciują ich receptory FceRI związane z IgE, komórki RBL-2H3 uwalniają wstępnie uformowane i nowo zsyntetyzowane mediatory, przyczyniając się do immunologicznych odpowiedzi alergicznych. Degranulacja komórek RBL-2H3 dostarczyła również wglądu w degranulację bazofilów. Komórki te mogą również ulegać degranulacji w odpowiedzi na bodźce nieimmunologiczne i istnieją różnice między MMC, RBL-2H3 i CTMC.
Rola wapnia w degranulacji komórek RBL-2H3 jest znacząca. Jonofor wapnia A23187, który zwiększa wewnątrzkomórkowy poziom wapnia, indukuje degranulację w komórkach RBL-2H3, podobnie jak w komórkach tucznych i bazofilach. Niektóre badania opisują komórki RBL-2H3 jako linię komórkową uwalniającą serotoninę.- Chusteczka
- Krew obwodowa
- Choroba
- Białaczka szczurów
- Synonimy
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Klasyfikacja
- Organizm
- Szczur
- Właściwości związane ze wzrostem
- Zwolennik
- Poziom bezpieczeństwa biologicznego
- 1
03Cechy charakterystyczne
- Morfologia
- Fibroblast
04Identyfikatory
- Źródło
- RBL-2H3 (numer katalogowy Cytion 305194)
- Numer identyfikacji podatkowej NCBI
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Postępowanie i hodowla
- Pożywka hodowlana
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
- Atmosfera inkubacyjna
37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.
- Suplementy
- Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
- Odczynnik dysocjacyjny
- Accutase
- Hodowla komórek w subkulturze
- Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
- Odnawianie płynów
- 2 do 3 razy w tygodniu
- Rozmrażanie i hodowla
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola jakości i kriokonserwacja
- Bezpłodność
Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.
Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.
- Pożywka do zamrażania
- Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
- Warunki przechowywania
W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.
- Warunki wysyłki
Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.
07Darczyńca
- Rasa / podgatunek
- Wistar
08Kwestie prawne i bezpieczeństwo
- Środki bezpieczeństwa
- Planując przechowywanie kriofiolek w ciekłym azocie w celu ich późniejszego rozmrożenia, należy bezwzględnie przestrzegać rygorystycznych środków bezpieczeństwa. Niezbędne są odpowiednie rękawice i odzież ochronna, a podczas przenoszenia zamrożonych próbek do lub ze zbiornika z ciekłym azotem wymagane jest stosowanie maski lub okularów ochronnych. Ma to na celu zmniejszenie ryzyka obrażeń spowodowanych potencjalnymi eksplozjami kriowialu podczas wyjmowania, które mogą skutkować wyrzuceniem ostrych fragmentów.
- Gwarancja
W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu
Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym
- Wymagana umowa o transferze materiałów
- Tak