Przejdź do treści
RBL-2H3
Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Białaczka szczurów
Synonimy
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Dokumenty

RBL-2H3

Cell line · Numer produktu 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa RBL-2H3 stała się cennym narzędziem do badania fizjologii komórek tucznych. Komórki RBL-2H3 wykazują ekspresję proteazy szczurzych komórek tucznych II (RMCP-II) i kinazy tyrozynowej receptora c-kit, co czyni je potencjalnym modelem komórek tucznych. Zgłoszono jednak sprzeczne i czasami mylące dane dotyczące komórek RBL-2H3.

Komórki RBL-2H3 były szeroko stosowane do badania różnych aspektów funkcji komórek tucznych, w tym degranulacji, stabilizatorów komórek tucznych i interakcji receptorów FceRI z cytoszkieletem. Wyrażają one receptory IgE o wysokim powinowactwie i mogą być aktywowane do wydzielania histaminy i innych mediatorów. Hodowla komórek RBL-2H3 jest stosunkowo łatwa, a dłuższy czas hodowli skutkuje większą gęstością komórek.

Degranulacja jest kluczową cechą komórek RBL-2H3, podobną do komórek tucznych i bazofilów. Gdy alergeny sieciują ich receptory FceRI związane z IgE, komórki RBL-2H3 uwalniają wstępnie uformowane i nowo zsyntetyzowane mediatory, przyczyniając się do immunologicznych odpowiedzi alergicznych. Degranulacja komórek RBL-2H3 dostarczyła również wglądu w degranulację bazofilów. Komórki te mogą również ulegać degranulacji w odpowiedzi na bodźce nieimmunologiczne i istnieją różnice między MMC, RBL-2H3 i CTMC.
Rola wapnia w degranulacji komórek RBL-2H3 jest znacząca. Jonofor wapnia A23187, który zwiększa wewnątrzkomórkowy poziom wapnia, indukuje degranulację w komórkach RBL-2H3, podobnie jak w komórkach tucznych i bazofilach. Niektóre badania opisują komórki RBL-2H3 jako linię komórkową uwalniającą serotoninę.

Chusteczka
Krew obwodowa
Choroba
Białaczka szczurów
Synonimy
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Klasyfikacja

Organizm
Szczur
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Fibroblast

04Identyfikatory

Źródło
RBL-2H3 (numer katalogowy Cytion 305194)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-glutamina, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (numer artykułu Cytion 820100a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS i 1% NEAA
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

07Darczyńca

Rasa / podgatunek
Wistar