Langsung ke isi
RBL-2H3
Tisu
Darah tepi
Penyakit
Leukemia tikus
Sinonim
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Dokumen

RBL-2H3

Cell line · Nomor produk 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

Garis sel RBL-2H3 telah menjadi alat yang berharga untuk mempelajari fisiologi sel mast. Sel RBL-2H3 mengekspresikan rat mast cell protease II (RMCP-II) dan reseptor c-kit tirosin kinase, menjadikannya model potensial untuk sel mast. Namun, data yang saling bertentangan dan terkadang menyesatkan tentang sel RBL-2H3 telah dilaporkan.

Sel RBL-2H3 telah banyak digunakan untuk menyelidiki berbagai aspek fungsi sel mast, termasuk degranulasi, penstabil sel mast, dan interaksi reseptor FceRI dengan sitoskeleton. Mereka mengekspresikan reseptor IgE afinitas tinggi dan dapat diaktifkan untuk mengeluarkan histamin dan mediator lainnya. Membudidayakan sel RBL-2H3 relatif mudah, dan waktu kultur yang lebih lama menghasilkan kepadatan sel yang lebih tinggi.

Degranulasi adalah fitur utama dari sel RBL-2H3, mirip dengan sel mast dan basofil. Ketika alergen mengikat silang reseptor FceRI yang terikat IgE, sel RBL-2H3 melepaskan mediator yang telah dibentuk sebelumnya dan yang baru disintesis, yang berkontribusi pada respons alergi kekebalan tubuh. Degranulasi sel RBL-2H3 telah memberikan wawasan tentang degranulasi basofil juga. Sel-sel ini juga dapat mengalami degranulasi sebagai respons terhadap rangsangan non-imunologis, dan terdapat perbedaan antara MMC, RBL-2H3, dan CTMC.
Peran kalsium dalam degranulasi sel RBL-2H3 sangat penting. Ionofor kalsium A23187, yang meningkatkan kadar kalsium intraseluler, menginduksi degranulasi pada sel RBL-2H3, mirip dengan sel mast dan basofil. Beberapa penelitian telah menggambarkan sel RBL-2H3 sebagai garis sel pelepas serotonin.

Tisu
Darah tepi
Penyakit
Leukemia tikus
Sinonim
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Klasifikasi

Organisme
Tikus
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Morfologi
Fibroblast

04Pengidentifikasi

Referensi
RBL-2H3 (nomor katalog Cytion 305194)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Penanganan dan budidaya

Media kultur
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (nomor artikel Cytion 820100a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Lengkapi media dengan 10% FBS dan 1% NEAA
Reagen disosiasi
Accutase
Perbanyakan sel
Buang media lama dari sel yang melekat dan cuci dengan PBS yang tidak mengandung kalsium dan magnesium. Untuk labu T25, gunakan 3-5 ml PBS, dan untuk labu T75, gunakan 5-10 ml. Kemudian, tutupi sel sepenuhnya dengan Accutase, menggunakan 1-2 ml untuk labu T25 dan 2,5 ml untuk labu T75. Biarkan sel diinkubasi pada suhu kamar selama 8-10 menit untuk melepaskannya. Setelah inkubasi, campurkan sel secara perlahan dengan 10 ml medium untuk meresuspensi sel, kemudian sentrifugasi pada 300xg selama 3 menit. Buang supernatan, resuspensi sel dalam medium segar, dan pindahkan ke dalam labu baru yang sudah berisi medium segar.
Pergantian cairan
2 hingga 3 kali per minggu
Pencairan dan pembiakan

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Kemandulan

Kontaminasi mikoplasma disingkirkan dengan menggunakan tes berbasis PCR dan metode deteksi mikoplasma berbasis pendaran.

Untuk memastikan tidak ada kontaminasi bakteri, jamur, atau ragi, kultur sel menjalani inspeksi visual setiap hari.

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap (termasuk FBS) + 10% DMSO untuk viabilitas pasca-pencairan yang memadai, atau CM-1 (nomor katalog Cytion 800100), yang mencakup osmoprotektan yang dioptimalkan dan penstabil metabolisme untuk meningkatkan pemulihan dan mengurangi stres yang diinduksi kriopreservasi.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

07Donatur

Jenis / subspesies
Wistar