RBL-2H3
Cell line · Produktnummer 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
Tilpasning / Anbefalinger
- RBL-2H3Cell line€430.00
Anbefalt (det ferskeste partiet)
01Generell informasjon
- Beskrivelse
RBL-2H3-cellelinjen har blitt et verdifullt verktøy for å studere mastcellenes fysiologi. RBL-2H3-celler uttrykker rotte-mastcelleprotease II (RMCP-II) og c-kit-reseptortyrosinkinase, noe som gjør dem til en potensiell modell for mastceller. Det er imidlertid rapportert motstridende og noen ganger misvisende data om RBL-2H3-celler.
RBL-2H3-celler har blitt mye brukt til å undersøke ulike aspekter ved mastcellenes funksjon, blant annet degranulering, mastcellestabilisatorer og FceRI-reseptorenes interaksjon med cytoskjelettet. De uttrykker IgE-reseptorer med høy affinitet og kan aktiveres til å skille ut histamin og andre mediatorer. Det er relativt enkelt å dyrke RBL-2H3-celler, og lengre dyrkningstid gir høyere celletetthet.
Degranulering er en viktig egenskap ved RBL-2H3-celler, i likhet med mastceller og basofiler. Når allergener krysskobler deres IgE-bundne FceRI-reseptorer, frigjør RBL-2H3-celler preformerte og nysyntetiserte mediatorer, noe som bidrar til allergiske immunreaksjoner. Degranuleringen av RBL-2H3-celler har også gitt innsikt i basofil degranulering. Disse cellene kan også degranulere som respons på ikke-immunologiske stimuli, og det er forskjeller mellom MMC, RBL-2H3 og CTMC.
Kalsium spiller en viktig rolle i degranuleringen av RBL-2H3-celler. Kalsiumionoforen A23187, som øker det intracellulære kalsiumnivået, induserer degranulering i RBL-2H3-celler, på samme måte som mastceller og basofiler. Noen studier har beskrevet RBL-2H3-celler som en serotoninfrigjørende cellelinje.- Vev
- Perifert blod
- Sykdom
- Leukemi hos rotter
- Synonymer
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Klassifisering
- Organisme
- Rotte
- Vekstegenskaper
- Tilhenger
- Biosikkerhetsnivå
- 1
03Egenskaper
- Morfologi
- Fibroblast
04Identifikatorer
- Kildehenvisning
- RBL-2H3 (Cytion katalognummer 305194)
- NCBI-skattenummer
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Håndtering og kultur
- Næringsmedium
- EMEM (MEM Eagle), m: 2 mM L-Glutamin, m: 2,2 g/L NaHCO3, m: EBSS (Cytion artikkelnummer 820100a)
- Inkubasjonsatmosfære
37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.
- Kosttilskudd
- Suppler mediet med 10 % FBS og 1 % NEAA
- Dissosiasjonsmiddel
- Accutase
- Subkultivering
- Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
- Væskefornyelse
- 2 til 3 ganger per uke
- Tining og dyrking
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvalitetskontroll og kryokonservering
- Sterilitet
Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.
For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.
- Frysemedium
- Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
- Oppbevaringsbetingelser
For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.
- Fraktvilkår
Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.
07Donor
- Rase / underart
- Wistar
08Juridisk og sikkerhet
- Sikkerhetsregler
- Når du planlegger å oppbevare et kryovial i flytende nitrogen for senere tining, er det obligatorisk å følge strenge sikkerhetstiltak. Det er viktig å bruke egnede vernehansker og -klær, og det er påbudt å bruke ansiktsmaske eller vernebriller under overføring av frosne prøver til eller fra tanken med flytende nitrogen. Dette er for å redusere risikoen for skader som følge av potensielle kryovæskeeksplosjoner ved fjerning, noe som kan føre til at skarpe fragmenter slynges ut.
- Garanti
Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket
For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring
- Avtale om materialoverføring kreves
- Ja