Skip to content
RBL-2H3
Tissue
דם היקפי
Disease
לוקמיה של חולדות
Synonyms
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Documents

RBL-2H3

Cell line · Product number 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

US$395.00excl. tax and shipping
In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

קו התאים RBL-2H3 הפך לכלי חשוב לחקר הפיזיולוגיה של תאי פיטום. תאי RBL-2H3 מבטאים פרוטאז II של תאי פיטום בחולדות (RMCP-II) ואת קולטן c-kit טירוזין קינאז, מה שהופך אותם למודל פוטנציאלי לתאי פיטום. עם זאת, דווחו נתונים סותרים ולעיתים מטעים אודות תאי RBL-2H3.

תאי RBL-2H3 שימשו רבות לחקר היבטים שונים של תפקוד תאי פיטום, כולל דגרנולציה, מייצבי תאי פיטום והאינטראקציה של קולטני FceRI עם שלד התא. הם מבטאים קולטני IgE בעלי זיקה גבוהה וניתן להפעילם כדי להפריש היסטמין ומתווכים אחרים. גידול תאי RBL-2H3 הוא קל יחסית, וגידול ממושך יותר מביא לצפיפות תאים גבוהה יותר.

דה-גרנולציה היא מאפיין מרכזי של תאי RBL-2H3, בדומה לתאי פיטום ובזופילים. כאשר אלרגנים יוצרים קשרים צולבים עם קולטני FceRI הקשורים ל-IgE, תאי RBL-2H3 משחררים מתווכים שנוצרו מראש ומתווכים שנוצרו זה עתה, התורמים לתגובות אלרגיות חיסוניות. דה-גרנולציה של תאי RBL-2H3 סיפקה תובנות גם לגבי דה-גרנולציה של בזופילים. תאים אלה יכולים לעבור דה-גרנולציה גם בתגובה לגירויים לא-אימונולוגיים, וישנם הבדלים בין MMC, RBL-2H3 ו-CTMC.
לתפקיד הסידן בפירוק תאי RBL-2H3 יש חשיבות רבה. יונופור הסידן A23187, המגביר את רמות הסידן התוך-תאיות, גורם לפירוק תאי RBL-2H3, בדומה לתאי פיטום ובזופילים. מחקרים מסוימים תיארו את תאי RBL-2H3 כקו תאים המשחרר סרוטונין.

Tissue
דם היקפי
Disease
לוקמיה של חולדות
Synonyms
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
פיברובלסט

04Identifiers

Citation
RBL-2H3 (מספר קטלוג של Cytion: 305194)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (מספר קטלוגי Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, אווירה לחה.

Supplements
הוסף לתמיסה 10% FBS ו-1% NEAA
Dissociation reagent
אקוטאז
Subculturing
הסר את המדיום הישן מהתאים הדבוקים ושטוף אותם ב-PBS ללא סידן ומגנזיום. עבור בקבוקי T25, השתמש ב-3-5 מ"ל PBS, ועבור בקבוקי T75, השתמש ב-5-10 מ"ל. לאחר מכן, כסה את התאים לחלוטין ב-Accutase, תוך שימוש ב-1-2 מ"ל עבור בקבוקי T25 ו-2.5 מ"ל עבור בקבוקי T75. השאר את התאים לדגירה בטמפרטורת החדר למשך 8-10 דקות כדי לנתק אותם. לאחר הדגירה, ערבב בעדינות את התאים עם 10 מ"ל של מדיום כדי להחזיר אותם לתמיסה, ואז סובב בצנטריפוגה ב-300xg למשך 3 דקות. השלך את הנוזל העליון, החזר את התאים לתמיסה במדיום טרי והעבר אותם לצלחות חדשות שכבר מכילות מדיום טרי.
Fluid renewal
2 עד 3 פעמים בשבוע
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

זיהום במיקופלסמה נשלל באמצעות בדיקות מבוססות PCR ושיטות זיהוי מיקופלסמה מבוססות לומניסצנציה.

כדי להבטיח שאין זיהום חיידקי, פטרייתי או שמרי, תרבויות התאים עוברות בדיקות ויזואליות יומיות.

Freeze medium
כמדיום לשימור בקירור, אנו משתמשים במדיום גידול מלא (כולל FBS) + 10% DMSO כדי להבטיח חיוניות נאותה לאחר ההפשרה, או CM-1 (מספר קטלוגי Cytion 800100), הכולל חומרים אוסמו-מגנים ומייצבי מטבוליזם משופרים כדי לשפר את ההתאוששות ולהפחית את הלחץ הנגרם מהקפאה.
Storage conditions

לשימור לטווח ארוך, יש להניח את הבקבוקונים בחנקן נוזלי במצב של אדי בטמפרטורה של כ-150 עד 196 מעלות צלזיוס. אחסון בטמפרטורה של 80 מעלות צלזיוס מקובל רק כצעד ביניים קצר לפני העברה לחנקן נוזלי.

Shipping conditions

שורות תאים שהוקפאו נשלחות בקרח יבש באריזה מאושרת ומבודדת עם כמות מספקת של חומר קירור כדי לשמור על טמפרטורה של כ-78°C- במהלך ההובלה. עם קבלת המשלוח, יש לבדוק את המכל מיד ולהעביר את הבקבוקונים ללא דיחוי לאחסון מתאים.

07Donor

Breed / subspecies
ויסטאר