RBL-2H3
Cell line · Product number 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
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01General information
- Description
RBL-2H3 細胞系已成為研究肥大細胞生理學的寶貴工具。 RBL-2H3 細胞表達大鼠肥大細胞蛋白酶 II（RMCP-II）及 c-kit 受體酪胺酸激酶，使其成為肥大細胞的潛在模型。然而，關於 RBL-2H3 細胞的相關研究數據存在矛盾，有時甚至會產生誤導。
RBL-2H3 細胞已被廣泛用於研究肥大細胞功能的各個方面，包括脫顆粒、肥大細胞穩定劑，以及 FceRI 受體與細胞骨架的相互作用。它們表達高親和力的 IgE 受體，並可被激活以分泌組胺和其他介質。 RBL-2H3 細胞的培養相對容易，且培養時間越長，細胞密度越高。
脫顆粒是 RBL-2H3 細胞的一項關鍵特徵，這點與肥大細胞和嗜鹼性粒細胞相似。當過敏原交聯其與 IgE 結合的 FceRI 受體時，RBL-2H3 細胞會釋放預先形成的及新合成的介質，從而引發免疫性過敏反應。 RBL-2H3 細胞的脫顆粒現象，也為嗜鹼性粒細胞的脫顆粒機制提供了新的見解。這些細胞亦可能因非免疫性刺激而發生脫顆粒，且 MMC、RBL-2H3 與 CTMC 之間存在差異。
鈣離子在 RBL-2H3 細胞脫顆粒過程中的作用至關重要。 鈣離子轉運劑 A23187 可提高細胞內鈣離子濃度，並會誘導 RBL-2H3 細胞發生脫顆粒，其作用機制與肥大細胞及嗜鹼性粒細胞相似。部分研究將 RBL-2H3 細胞描述為一種血清素釋放細胞系。- Tissue
- 外周血
- Disease
- 大鼠白血病
- Synonyms
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Classification
- Organism
- Rat
- Growth properties
- Adherent
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Morphology
- 成纖維細胞
04Identifiers
- Citation
- RBL-2H3（Cytion 型號 305194）
- NCBI TaxID
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Handling and culture
- Culture medium
- EMEM（MEM Eagle），含 2 mM L-谷氨醯胺，含 2.2 g/L NaHCO₃，含 EBSS（Cytion 產品編號 820100a）
- Incubation atmosphere
37°C，5% CO₂，加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% FBS 和 1% NEAA
- Dissociation reagent
- Accutase
- Subculturing
- 從貼壁細胞中移除舊培養基，並用不含鈣和鎂的PBS洗滌細胞。T25培養瓶使用3-5毫升PBS，T75培養瓶則使用5-10毫升。 接著，用 Accutase 完全覆蓋細胞，T25 培養瓶使用 1–2 毫升，T75 培養瓶則使用 2.5 毫升。將細胞於室溫下孵育 8–10 分鐘，使其脫附。 孵育後，將細胞與 10 毫升培養基輕柔混合以使其重新懸浮，然後以 300xg 離心 3 分鐘。棄去上清液，將細胞重新懸浮於新鮮培養基中，並轉移至已預先加入新鮮培養基的新培養瓶中。
- Fluid renewal
- 每週 2 至 3 次
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Quality control and cryopreservation
- Sterility
透過基於 PCR 的檢測及基於發光原理的支原體檢測方法，排除支原體污染的可能性。
為確保無細菌、真菌或酵母菌污染，每日均會對細胞培養物進行目視檢查。
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基，我們使用完全生長培養基（含 FBS）+ 10% DMSO 以確保解凍後的存活率，或使用 CM-1 （Cytion 型號 800100），該培養基含有經優化的滲透保護劑和代謝穩定劑，可提升細胞恢復率並減輕冷凍誘導的壓力。
- Storage conditions
若需長期保存，請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前，可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中，作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏，並裝於經驗證的隔熱包裝中，包裝內含有足夠的冷媒，以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後，請立即檢查容器，並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
07Donor
- Breed / subspecies
- 威斯塔
08Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍，必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服，且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時，必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險，此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion，我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證，自本公司設施出貨後 60 天內，我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及／或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes