Перейти до вмісту
RBL-2H3
Тканина
Периферична кров
Хвороба
Лейкемія щурів
Синоніми
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Документи

RBL-2H3

Cell line · Номер товару 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
  • CoA
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія RBL-2H3 стала цінним інструментом для вивчення фізіології тучних клітин. Клітини RBL-2H3 експресують протеазу тучних клітин щурів II (RMCP-II) і тирозинкіназу рецептора c-kit, що робить їх потенційною моделлю тучних клітин. Однак про клітини RBL-2H3 є суперечливі, а іноді й оманливі дані.

Клітини RBL-2H3 широко використовуються для дослідження різних аспектів функції тучних клітин, включаючи дегрануляцію, стабілізатори тучних клітин та взаємодію рецепторів FceRI з цитоскелетом. Вони експресують високоафінні рецептори IgE і можуть бути активовані для секреції гістаміну та інших медіаторів. Культивувати клітини RBL-2H3 відносно легко, а довший час культивування призводить до вищої щільності клітин.

Дегрануляція є ключовою особливістю клітин RBL-2H3, подібно до тучних клітин та базофілів. Коли алергени зшивають їхні IgE-зв'язані рецептори FceRI, клітини RBL-2H3 вивільняють попередньо сформовані та новосинтезовані медіатори, сприяючи імунній алергічній відповіді. Дегрануляція клітин RBL-2H3 дозволила отримати уявлення про дегрануляцію базофілів. Ці клітини також можуть піддаватися дегрануляції у відповідь на неімунологічні стимули, причому існують відмінності між ГМК, RBL-2H3 і CTMC.
Роль кальцію в дегрануляції клітин RBL-2H3 є значною. Іонофор кальцію A23187, який підвищує внутрішньоклітинний рівень кальцію, індукує дегрануляцію клітин RBL-2H3, подібно до тучних клітин і базофілів. Деякі дослідження описують клітини RBL-2H3 як клітинні лінії, що вивільняють серотонін.

Тканина
Периферична кров
Хвороба
Лейкемія щурів
Синоніми
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Класифікація

Організм
Щур
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Фібробласт

04Ідентифікатори

Посилання
RBL-2H3 (номер у каталозі Cytion — 305194)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10116
Целозавр
CVCL_0591

05Обробка та вирощування

Живильне середовище
EMEM (MEM Eagle), w: 2 мМ L-глутамін, w: 2,2 г/л NaHCO3, w: EBSS (цит. номер 820100a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS та 1% NEAA
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

07Донор

Порода / підвид
Вістар