Ga naar de inhoud
RBL-2H3
Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Leukemie bij ratten
Synoniemen
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Documenten

RBL-2H3

Cell line · Productnummer 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00excl. btw en verzendkosten

Maatwerk / Aanbevelingen

Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De RBL-2H3 cellijn is een waardevol instrument geworden voor het bestuderen van mastcelfysiologie. RBL-2H3 cellen brengen rat mastcelprotease II (RMCP-II) en het c-kit receptor tyrosinekinase tot expressie, waardoor ze een potentieel model voor mestcellen vormen. Er zijn echter tegenstrijdige en soms misleidende gegevens over RBL-2H3 cellen gerapporteerd.

RBL-2H3 cellen zijn op grote schaal gebruikt om verschillende aspecten van de werking van mestcellen te onderzoeken, waaronder degranulatie, mestcelstabilisatoren en de interactie van FceRI receptoren met het cytoskelet. Ze brengen IgE-receptoren met hoge affiniteit tot expressie en kunnen geactiveerd worden om histamine en andere mediatoren af te scheiden. Het kweken van RBL-2H3 cellen is relatief eenvoudig en een langere kweektijd resulteert in een hogere celdichtheid.

Degranulatie is een belangrijk kenmerk van RBL-2H3 cellen, vergelijkbaar met mestcellen en basofielen. Wanneer allergenen hun IgE-gebonden FceRI-receptoren kruisen, geven RBL-2H3 cellen vooraf gevormde en nieuw gesynthetiseerde mediatoren vrij, wat bijdraagt aan de immuunallergische respons. De degranulatie van RBL-2H3 cellen heeft ook inzicht gegeven in de degranulatie van basofielen. Deze cellen kunnen ook degranuleren als reactie op niet-immunologische prikkels en er zijn verschillen tussen MMC, RBL-2H3 en CTMC.
De rol van calcium in degranulatie van RBL-2H3 cellen is significant. De calciumionofoor A23187, die de intracellulaire calciumniveaus verhoogt, induceert degranulatie in RBL-2H3 cellen, vergelijkbaar met mestcellen en basofielen. Sommige studies hebben RBL-2H3 cellen beschreven als een serotonine-afgevende cellijn.

Weefsel
Perifeer bloed
Ziekte
Leukemie bij ratten
Synoniemen
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Classificatie

Organisme
Rat
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
1

03Kenmerken

Morfologie
Fibroblast

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
RBL-2H3 (Cytion catalogusnummer 305194)
NCBI-belastingnummer
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Behandeling en kweek

Kweekmedium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion artikelnummer 820100a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS en 1% NEAA
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Vloeistofverversing
2 tot 3 keer per week
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

07Donateur

Soort / ondersoort
Wistar