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RBL-2H3
ティッシュ
末梢血
病気
ラット白血病
同義語
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

RBL-2H3

Cell line · 製品番号 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00税・送料別

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01概要

説明

RBL-2H3細胞株は、肥満細胞の生理学を研究するための貴重なツールとなっている。RBL-2H3細胞はラット肥満細胞プロテアーゼII(RMCP-II)とc-kitレセプター・チロシンキナーゼを発現しており、肥満細胞のモデルとなりうる。しかしながら、RBL-2H3細胞については、相反する、時には誤解を招くようなデータが報告されている。

RBL-2H3細胞は、脱顆粒、肥満細胞安定化因子、FceRIレセプターと細胞骨格との相互作用など、肥満細胞機能の様々な側面を研究するために広く用いられてきた。RBL-2細胞は高親和性IgEレセプターを発現し、活性化されてヒスタミンや他のメディエーターを分泌する。RBL-2H3細胞の培養は比較的容易で、培養時間が長いほど細胞密度は高くなる。

脱顆粒はRBL-2H3細胞の重要な特徴であり、マスト細胞や好塩基球と同様である。アレルゲンがIgEに結合したFceRIレセプターを架橋すると、RBL-2H3細胞はあらかじめ形成されたメディエーターと新たに合成されたメディエーターを放出し、免疫アレルギー反応に寄与する。RBL-2H3細胞の脱顆粒は、好塩基球の脱顆粒についても洞察を与えている。これらの細胞は非免疫学的刺激に対しても脱顆粒を起こすことがあり、MMC、RBL-2H3、CTMCの間には違いがある。
RBL-2H3細胞の脱顆粒におけるカルシウムの役割は大きい。細胞内カルシウム濃度を上昇させるカルシウムイオノフォアA23187は、マスト細胞や好塩基球と同様にRBL-2H3細胞の脱顆粒を誘導する。RBL-2H3細胞はセロトニン放出細胞株であるとする研究もある。

ティッシュ
末梢血
病気
ラット白血病
同義語
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02分類

生物
ネズミ
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
線維芽細胞

04識別子

引用
RBL-2H3(Cytion カタログ番号 305194)
NCBI 納税者番号
10116
セロサウルス
CVCL_0591

05取り扱いと飼育

培地
EMEM(MEM Eagle)、w:2 mM L-グルタミン、w:2.2 g/L NaHCO3、w:EBSS(Cytion論文番号820100a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSと1% NEAAを添加する。
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
流体の更新
週2~3回
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

07寄付者

品種/亜種
ウィスター