RBL-2H3
Cell line · Číslo výrobku 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
Prispôsobenie / Odporúčania
- RBL-2H3Cell line€430.00
Odporúčané (najčerstvejšia várka)
01Všeobecné informácie
- Popis
Bunková línia RBL-2H3 sa stala cenným nástrojom na štúdium fyziológie mastocytov. Bunky RBL-2H3 exprimujú proteázu II potkaních mastocytov (RMCP-II) a receptorovú tyrozínkinázu c-kit, čo z nich robí potenciálny model mastocytov. O bunkách RBL-2H3 sa však uvádzajú protichodné a niekedy zavádzajúce údaje.
Bunky RBL-2H3 sa široko využívajú na skúmanie rôznych aspektov funkcie mastocytov vrátane degranulácie, stabilizátorov mastocytov a interakcie receptorov FceRI s cytoskeletom. Expresujú vysokoafinitné IgE receptory a môžu byť aktivované na vylučovanie histamínu a iných mediátorov. Kultivácia buniek RBL-2H3 je pomerne jednoduchá a dlhší čas kultivácie vedie k vyššej hustote buniek.
Degranulácia je kľúčovou vlastnosťou buniek RBL-2H3, podobne ako u žírnych buniek a bazofilov. Keď alergény zosieťujú svoje receptory FceRI viazané na IgE, bunky RBL-2H3 uvoľňujú predformované a novo syntetizované mediátory, čo prispieva k imunitným alergickým reakciám. Degranulácia buniek RBL-2H3 umožnila nahliadnuť aj do degranulácie bazofilov. Tieto bunky môžu podliehať degranulácii aj v reakcii na neimunologické podnety a medzi MMC, RBL-2H3 a CTMC existujú rozdiely.
Úloha vápnika pri degranulácii buniek RBL-2H3 je významná. Ionofor vápnika A23187, ktorý zvyšuje intracelulárnu hladinu vápnika, vyvoláva degranuláciu v bunkách RBL-2H3 podobne ako žírne bunky a bazofily. Niektoré štúdie opísali bunky RBL-2H3 ako bunkovú líniu uvoľňujúcu serotonín.- Tkanivo
- Periférna krv
- Choroba
- Leukémia potkanov
- Synonymá
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Klasifikácia
- Organizmus
- Potkan
- Rastové vlastnosti
- Prívrženec
- Úroveň biologickej bezpečnosti
- 1
03Charakteristiky
- Morfológia
- Fibroblasty
04Identifikátory
- Citácia
- RBL-2H3 (katalógové číslo Cytion 305194)
- Daňové identifikačné číslo NCBI
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Manipulácia a kultivácia
- Kultivačné médium
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamín, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion číslo článku 820100a)
- Inkubačná atmosféra
37 °C, 5 %CO2, zvlhčená atmosféra.
- Doplnky stravy
- Doplňte médium o 10% FBS a 1% NEAA
- Disociačné činidlo
- Accutase
- Rozmnožovanie kultúr
- Odstráňte staré médium z adherovaných buniek a premyte ich PBS, ktorý neobsahuje vápnik a horčík. Pre banky T25 použite 3 - 5 ml PBS a pre banky T75 použite 5 - 10 ml. Potom bunky úplne pokryte Accutase, pričom použite 1 - 2 ml pre banky T25 a 2,5 ml pre banky T75. Nechajte bunky inkubovať pri izbovej teplote 8-10 minút, aby sa oddelili. Po inkubácii jemne premiešajte bunky s 10 ml média, aby boli znovu suspendované, a potom ich 3 minúty odstreďujte pri 300xg. Supernatant zlikvidujte, bunky znovu rozmiešajte v čerstvom médiu a preneste ich do nových fliaš, ktoré už obsahujú čerstvé médium.
- Obnova kvapaliny
- 2 až 3-krát týždenne
- Rozmrazovanie a kultivácia
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kontrola kvality a kryokonzervácia
- Sterilita
Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.
Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.
- Mrazové médium
- Ako kryokonzervačné médium používame kompletné rastové médium (vrátane FBS) + 10 % DMSO na zabezpečenie primeranej životaschopnosti po rozmrazení alebo CM-1 (katalógové číslo 800100 spoločnosti Cytion), ktoré obsahuje optimalizované osmoprotektanty a metabolické stabilizátory na zlepšenie obnovy a zníženie stresu spôsobeného kryo.
- Podmienky skladovania
Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.
- Dopravné podmienky
Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.
07Darca
- Plemeno / poddruh
- Wistar
08Právne informácie a bezpečnosť
- Bezpečnostné opatrenia
- Pri plánovaní uskladnenia kryovírusu v kvapalnom dusíku na budúce rozmrazenie je potrebné dodržiavať prísne bezpečnostné opatrenia. Vhodné ochranné rukavice a odev sú nevyhnutné a počas prenosu zmrazených vzoriek do nádrže s tekutým dusíkom alebo z nej sa vyžaduje používanie tvárovej masky alebo ochranných okuliarov. Je to z dôvodu zníženia rizika poranenia v dôsledku možnej explózie kryovírusu pri vyberaní, ktorá môže mať za následok vymrštenie ostrých úlomkov.
- Záruka
V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste
Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke
- Je potrebná dohoda o prenose materiálu
- Áno
