RBL-2H3
Cell line · Toote number 305194
The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...
Kohandamine / Soovitused
- RBL-2H3Cell line€430.00
Soovitatav (värskeim partii)
01Üldine teave
- Kirjeldus
RBL-2H3 rakuliinist on saanud väärtuslik vahend nuumrakkude füsioloogia uurimiseks. RBL-2H3 rakud ekspresseerivad roti nuumrakkude proteaasi II (RMCP-II) ja c-kit retseptori türosiinkinaasi, mis muudab need rakud potentsiaalseks nuumrakkude mudeliks. Siiski on RBL-2H3 rakkude kohta esitatud vastuolulisi ja mõnikord eksitavaid andmeid.
RBL-2H3 rakke on laialdaselt kasutatud nuumrakkude funktsiooni erinevate aspektide, sealhulgas degranulatsiooni, nuumrakkude stabiliseerijate ja FceRI retseptorite ja tsütoskeleti koostoime uurimiseks. Nad ekspresseerivad kõrge afiinsusega IgE retseptoreid ja neid saab aktiveerida histamiini ja teiste mediaatorite eritamiseks. RBL-2H3 rakkude kultiveerimine on suhteliselt lihtne ja pikem kasvatusaeg annab suurema rakutiheduse.
Degranulatsioon on RBL-2H3 rakkude peamine omadus, sarnaselt masti- ja basofiilidega. Kui allergeenid ristuvad nende IgE-ga seotud FceRI retseptoritega, vabastavad RBL-2H3 rakud eelnevalt moodustatud ja äsja sünteesitud mediaatoreid, mis aitavad kaasa immuunsüsteemi allergilisele reaktsioonile. RBL-2H3 rakkude degranulatsioon on andnud ülevaate ka basofiilide degranulatsioonist. Need rakud võivad läbida degranulatsiooni ka vastusena mitteimmunoloogilistele stiimulitele ning MMC, RBL-2H3 ja CTMC vahel on erinevusi.
Kaltsiumi roll RBL-2H3 rakkude degranulatsioonis on märkimisväärne. Kaltsiumionofoor A23187, mis suurendab rakusisest kaltsiumitaset, kutsub RBL-2H3 rakkudes esile degranulatsiooni, sarnaselt nuumrakkudele ja basofiilidele. Mõned uuringud on kirjeldanud RBL-2H3 rakke kui serotoniini vabastavat rakuliini.- Kude
- Perifeerne veri
- Haigus
- Rottide leukeemia
- Sünonüümid
- RBL2H3
- RBL 2H3
- RBL.2H3
02Klassifikatsioon
- Organism
- Rott
- Kasvuvõime
- Järgija
- Bioloogilise ohutuse tase
- 1
03Omadused
- Morfoloogia
- Fibroblastide
04Tunnused
- Viide
- RBL-2H3 (Cytioni katalooginumber 305194)
- NCBI maksukood
- 10116
- Cellosaurus
- CVCL_0591
05Käsitlemine ja kasvatamine
- Kasvatuskeskkond
- EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamiin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytioni artikli number 820100a)
- Inkubatsiooni keskkond
37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.
- Toidulisandid
- Täiendada söötme 10% FBS ja 1% NEAAga
- Dissotsiatsioonireaktiiv
- Accutase
- Kultuuri edasikasvatamine
- Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
- Vedeliku vahetus
- 2 kuni 3 korda nädalas
- Sulatamine ja kasvatamine
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
06Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine
- Viljatus
Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.
Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.
- Külmutuskeskkond
- Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
- Säilitamistingimused
Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.
- Tarne- ja kohaletoimetamistingimused
Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.
07Annetaja
- Tõug / alamliik
- Wistar
08Õiguslikud ja ohutusalased küsimused
- Ohutusnõuded
- Kui plaanitakse krüoviaalide säilitamist vedelas lämmastikus tulevase sulatamise eesmärgil, on kohustuslik järgida rangeid ohutusmeetmeid. Asjakohased kaitsekindad ja -riietus on hädavajalikud ning külmutatud proovide vedela lämmastiku mahutisse või mahutist väljaviimisel tuleb kasutada näomaski või kaitseprille. See on vajalik selleks, et vähendada vigastuste ohtu, mis tuleneb võimalikest krüoviaalide plahvatustest eemaldamisel, mille tagajärjel võivad välja paiskuda teravad killud.
- Garantii
Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele
Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest
- Vajalik on materjalide üleandmise leping
- Jah
