RBL-2H3

La lignée cellulaire RBL-2H3 est devenue un outil précieux pour l’étude de la physiologie des mastocytes. Les cellules RBL-2H3 expriment la protéase II des mastocytes de rat (RMCP-II) et le récepteur tyrosine kinase c-kit, ce qui en fait un modèle potentiel pour les mastocytes. Cependant, des données contradictoires et parfois trompeuses concernant les cellules RBL-2H3 ont été rapportées.

Les cellules RBL-2H3 ont été largement utilisées pour étudier divers aspects de la fonction des mastocytes, notamment la dégranulation, les stabilisateurs de mastocytes et l’interaction des récepteurs FceRI avec le cytosquelette. Elles expriment des récepteurs IgE à haute affinité et peuvent être activées pour sécréter de l’histamine et d’autres médiateurs. La culture des cellules RBL-2H3 est relativement simple, et des durées de culture plus longues permettent d’obtenir une densité cellulaire plus élevée.

La dégranulation est une caractéristique clé des cellules RBL-2H3, à l’instar des mastocytes et des basophiles. Lorsque des allergènes provoquent une réticulation de leurs récepteurs FceRI liés à l’IgE, les cellules RBL-2H3 libèrent des médiateurs préformés et nouvellement synthétisés, contribuant ainsi aux réponses immunitaires allergiques. La dégranulation des cellules RBL-2H3 a également permis de mieux comprendre celle des basophiles. Ces cellules peuvent également subir une dégranulation en réponse à des stimuli non immunologiques, et il existe des différences entre les MMC, les RBL-2H3 et les CTMC.
Le rôle du calcium dans la dégranulation des cellules RBL-2H3 est important. L’ionophore calcique A23187, qui augmente les concentrations intracellulaires de calcium, induit la dégranulation des cellules RBL-2H3, à l’instar des mastocytes et des basophiles. Certaines études ont décrit les cellules RBL-2H3 comme une lignée cellulaire libérant de la sérotonine.

37 °C, 5 % _de CO_₂, atmosphère humidifiée.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contamination par les mycoplasmes est exclue à l'aide de tests basés sur la PCR et de méthodes de détection des mycoplasmes par luminescence.

Afin de s’assurer qu’il n’y a aucune contamination bactérienne, fongique ou par des levures, les cultures cellulaires font l’objet d’inspections visuelles quotidiennes.

Pour une conservation à long terme, placez les flacons dans de l’azote liquide en phase vapeur à une température comprise entre environ −150 et −196 °C. L’entreposage à −80 °C n’est acceptable qu’à titre d’étape intermédiaire de courte durée avant le transfert dans l’azote liquide.

Les lignées cellulaires cryoconservées sont expédiées dans de la glace sèche, dans un emballage isotherme validé contenant suffisamment de réfrigérant pour maintenir une température d’environ −78 °C pendant tout le transport. À la réception, inspectez immédiatement le conteneur et transférez sans délai les flacons dans un lieu de stockage approprié.

Chez Cytion, nous garantissons la qualité et la viabilité de nos produits. Nous garantissons que nos cellules seront viables au début de la culture pendant 60 jours à compter de leur expédition depuis nos installations. Nous assurons que tous les matériaux sont conformes aux spécifications décrites dans le certificat d’analyse et/ou la fiche technique du produit.

Pour plus de détails, veuillez consulter notre déclaration de garantie.