Skip to content
RBL-2H3
Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
มะเร็งเม็ดเลือดขาวในหนู
Synonyms
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

Documents

RBL-2H3

Cell line · Product number 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00excl. tax and shipping

Customization / Recommendations

In stock
Lot
Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

สายพันธุ์เซลล์ RBL-2H3 ได้กลายเป็นเครื่องมือที่มีคุณค่าสำหรับการศึกษาสรีรวิทยาของเซลล์แมสต์ เซลล์ RBL-2H3 แสดงโปรตีเอส II ของเซลล์แมสต์หนู (RMCP-II) และตัวรับไทโรซีนไคเนส c-kit ทำให้เซลล์เหล่านี้เป็นโมเดลที่มีศักยภาพสำหรับเซลล์แมสต์ อย่างไรก็ตาม มีรายงานข้อมูลที่ขัดแย้งและบางครั้งทำให้เข้าใจผิดเกี่ยวกับเซลล์ RBL-2H3

เซลล์ RBL-2H3 ถูกนำมาใช้อย่างแพร่หลายในการศึกษาด้านต่างๆ ของการทำงานของเซลล์แมสต์ รวมถึงการปลดปล่อยแกรนูล สารที่ช่วยคงสภาพเซลล์แมสต์ และการปฏิสัมพันธ์ของตัวรับ FceRI กับไซโตสเกเลตัน เซลล์เหล่านี้แสดงตัวรับ IgE ที่มีความจำเพาะสูงและสามารถถูกกระตุ้นให้หลั่งฮีสตามีนและสารสื่อประสาทอื่นๆ การเพาะเลี้ยงเซลล์ RBL-2H3 ค่อนข้างง่าย และระยะเวลาการเพาะเลี้ยงที่ยาวนานขึ้นจะส่งผลให้มีความหนาแน่นของเซลล์สูงขึ้น

การสลายตัวของเกล็ดเป็นลักษณะสำคัญของเซลล์ RBL-2H3 ซึ่งคล้ายกับเซลล์แมสต์และเบโซฟิล เมื่อสารก่อภูมิแพ้เชื่อมต่อกับตัวรับ FceRI ที่จับกับ IgE เซลล์ RBL-2H3 จะปล่อยตัวกลางที่เตรียมไว้ล่วงหน้าและที่สังเคราะห์ใหม่ ซึ่งส่งผลต่อการตอบสนองภูมิแพ้การสลายตัวของเม็ดสีในเซลล์ RBL-2H3 ได้ให้ข้อมูลเชิงลึกเกี่ยวกับการสลายตัวของเม็ดสีในเบโซฟิลด้วยเช่นกัน เซลล์เหล่านี้ยังสามารถเกิดการสลายตัวของเม็ดสีได้เมื่อตอบสนองต่อสิ่งกระตุ้นที่ไม่เกี่ยวข้องกับภูมิคุ้มกัน และมีความแตกต่างระหว่าง MMC, RBL-2H3 และ CTMC
บทบาทของแคลเซียมในการสลายเกล็ดของเซลล์ RBL-2H3 มีความสำคัญอย่างมาก ไอออนโนฟอร์แคลเซียม A23187 ซึ่งเพิ่มระดับแคลเซียมภายในเซลล์ สามารถกระตุ้นการสลายเกล็ดในเซลล์ RBL-2H3 ได้คล้ายกับเซลล์แมสต์และเบโซฟิล งานวิจัยบางชิ้นได้อธิบายว่าเซลล์ RBL-2H3 เป็นสายพันธุ์เซลล์ที่ปล่อยเซโรโทนิน

Tissue
เลือดส่วนปลาย
Disease
มะเร็งเม็ดเลือดขาวในหนู
Synonyms
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Classification

Organism
Rat
Growth properties
Adherent
Biosafety level
1

03Characteristics

Morphology
ไฟโบรบลาสต์

04Identifiers

Citation
RBL-2H3 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 305194)
NCBI TaxID
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05Handling and culture

Culture medium
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamine, w: 2.2 g/L NaHCO3, w: EBSS (หมายเลขบทความ Cytion 820100a)
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, บรรยากาศชื้น

Supplements
เติมอาหารเลี้ยงเชื้อด้วย FBS 10% และ NEAA 1%
Dissociation reagent
แอคคูเทส
Subculturing
นำอาหารเลี้ยงเซลล์เก่าออกจากเซลล์ที่เกาะติดและล้างด้วย PBS ที่ไม่มีแคลเซียมและแมกนีเซียม สำหรับขวด T25 ให้ใช้ PBS 3-5 มล. และสำหรับขวด T75 ให้ใช้ 5-10 มล. จากนั้นปิดเซลล์ให้มิดด้วย Accutase โดยใช้ 1-2 มล. สำหรับขวด T25 และ 2.5 มล. สำหรับขวด T75ปล่อยให้เซลล์บ่มที่อุณหภูมิห้องเป็นเวลา 8-10 นาทีเพื่อให้เซลล์หลุดออกจากกัน หลังจากบ่มแล้ว ให้ผสมเซลล์เบา ๆ กับอาหารเลี้ยงเซลล์ 10 มิลลิลิตรเพื่อทำให้เซลล์แขวนลอยอีกครั้ง จากนั้นปั่นเหวี่ยงที่ 300 เท่าของแรงโน้มถ่วงโลก (300xg) เป็นเวลา 3 นาที เทส่วนใสที่ได้ทิ้งไป แล้วแขวนลอยเซลล์ในอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ จากนั้นถ่ายเซลล์ไปยังขวดเพาะเลี้ยงใหม่ที่เติมอาหารเลี้ยงเซลล์ใหม่ไว้แล้ว
Fluid renewal
2 ถึง 3 ครั้งต่อสัปดาห์
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Quality control and cryopreservation

Sterility

การปนเปื้อนของไมโคพลาสมาถูกตัดออกโดยใช้ทั้งการทดสอบแบบ PCR และการตรวจหาไมโคพลาสมาโดยใช้วิธีการเรืองแสง

เพื่อให้แน่ใจว่าไม่มีการปนเปื้อนของแบคทีเรีย เชื้อรา หรือยีสต์ การเพาะเลี้ยงเซลล์จะถูกตรวจสอบด้วยสายตาทุกวัน

Freeze medium
ในฐานะที่เป็นสารอาหารสำหรับการแช่แข็ง เราใช้สารอาหารสำหรับการเจริญเติบโตแบบครบถ้วน (รวมถึง FBS) + 10% DMSO เพื่อความมีชีวิตหลังการละลายที่เพียงพอ หรือ CM-1 (หมายเลขแคตตาล็อก Cytion 800100) ซึ่งรวมถึงสารป้องกันออสโมติกและสารรักษาเสถียรภาพเมตาบอลิซึมที่ได้รับการปรับให้เหมาะสมเพื่อเพิ่มการฟื้นตัวและลดความเครียดที่เกิดจากการแช่แข็ง
Storage conditions

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

Shipping conditions

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

07Donor

Breed / subspecies
วิสตาร์