İçeriğe atla
RBL-2H3
Doku
Periferik kan
Hastalık
Sıçan lösemisi
Eş anlamlılar
RBL2H3, RBL 2H3, RBL.2H3

RBL-2H3

Cell line · Ürün numarası 305194

The RBL-2H3 cell line has become a valuable tool for studying mast cell physiology. RBL-2H3 cells express rat mast cell protease II (RMCP-II) and the c-ki...

€430.00vergi ve kargo hariç
Stokta mevcut
Lot
Önerilen (en taze parti)
  • CoA
1

01Genel bilgiler

Açıklama

RBL-2H3 hücre hattı, mast hücre fizyolojisini incelemek için değerli bir araç haline gelmiştir. RBL-2H3 hücreleri sıçan mast hücresi proteaz II (RMCP-II) ve c-kit reseptör tirozin kinazı eksprese ederek mast hücreleri için potansiyel bir model oluşturmaktadır. Bununla birlikte, RBL-2H3 hücreleri hakkında çelişkili ve bazen yanıltıcı veriler rapor edilmiştir.

RBL-2H3 hücreleri, degranülasyon, mast hücre stabilizatörleri ve FceRI reseptörlerinin hücre iskeleti ile etkileşimi dahil olmak üzere mast hücre fonksiyonunun çeşitli yönlerini araştırmak için yaygın olarak kullanılmaktadır. Yüksek afiniteli IgE reseptörlerini ifade ederler ve histamin ve diğer aracıları salgılamak için aktive edilebilirler. RBL-2H3 hücrelerinin kültüre edilmesi nispeten kolaydır ve daha uzun kültür süreleri daha yüksek hücre yoğunluğu ile sonuçlanır.

Degranülasyon, mast hücreleri ve bazofillere benzer şekilde RBL-2H3 hücrelerinin önemli bir özelliğidir. Alerjenler IgE'ye bağlı FceRI reseptörlerini çapraz bağladığında, RBL-2H3 hücreleri önceden oluşturulmuş ve yeni sentezlenmiş mediatörleri serbest bırakarak immün alerjik yanıtlara katkıda bulunur. RBL-2H3 hücrelerinin degranülasyonu, bazofil degranülasyonu hakkında da bilgi sağlamıştır. Bu hücreler immünolojik olmayan uyaranlara yanıt olarak da degranülasyona uğrayabilir ve MMC, RBL-2H3 ve CTMC arasında farklılıklar vardır.
RBL-2H3 hücre degranülasyonunda kalsiyumun rolü önemlidir. Hücre içi kalsiyum seviyelerini artıran kalsiyum iyonoforu A23187, mast hücreleri ve bazofillere benzer şekilde RBL-2H3 hücrelerinde degranülasyonu indükler. Bazı çalışmalar RBL-2H3 hücrelerini serotonin salgılayan bir hücre hattı olarak tanımlamıştır.

Doku
Periferik kan
Hastalık
Sıçan lösemisi
Eş anlamlılar
  • RBL2H3
  • RBL 2H3
  • RBL.2H3

02Sınıflandırma

Canlı
Sıçan
Büyüme özellikleri
Bağlı
Biyogüvenlik seviyesi
1

03Özellikler

Morfoloji
Fibroblast

04Tanımlayıcılar

Kaynak gösterimi
RBL-2H3 (Cytion katalog numarası 305194)
NCBI Vergi Kimlik Numarası
10116
Cellosaurus
CVCL_0591

05İşleme ve yetiştirme

Besiyeri
EMEM (MEM Eagle), w: 2 mM L-Glutamin, w: 2,2 g/L NaHCO3, w: EBSS (Cytion makale numarası 820100a)
Kuluçka ortamı

37°C, %5CO2, nemlendirilmiş atmosfer.

Takviyeler
Ortamı %10 FBS ve %1 NEAA ile takviye edin
Ayrıştırma reaktifi
Accutase
Alt kültür oluşturma
Yapışık hücrelerden eski ortamı çıkarın ve kalsiyum ve magnezyum içermeyen PBS ile yıkayın. T25 şişeleri için 3-5 ml PBS ve T75 şişeleri için 5-10 ml kullanın. Ardından, T25 flasklar için 1-2 ml ve T75 flasklar için 2,5 ml kullanarak hücreleri Accutase ile tamamen kaplayın. Hücreleri ayırmak için oda sıcaklığında 8-10 dakika inkübasyona bırakın. İnkübasyondan sonra, hücreleri yeniden süspanse etmek için 10 ml besiyeriyle hafifçe karıştırın, ardından 300xg'de 3 dakika santrifüjleyin. Süpernatantı atın, hücreleri taze besiyerinde yeniden süspanse edin ve zaten taze besiyeri içeren yeni şişelere aktarın.
Sıvı değişimi
haftada 2 ila 3 kez
Çözme ve kültürleme
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Kalite kontrol ve kriyoprezervasyon

Kısırlık

Mikoplazma kontaminasyonu hem PCR tabanlı tahliller hem de lüminesans tabanlı mikoplazma tespit yöntemleri kullanılarak dışlanır.

Bakteriyel, fungal veya maya kontaminasyonu olmadığından emin olmak için hücre kültürleri günlük görsel incelemelere tabi tutulur.

Dondurma ortamı
Kriyoprezervasyon ortamı olarak, yeterli çözülme sonrası canlılık için tam büyüme ortamı (FBS dahil) + %10 DMSO veya iyileşmeyi artırmak ve kriyo-indüklenmiş stresi azaltmak için optimize edilmiş ozmoprotektanlar ve metabolik stabilizatörler içeren CM-1 (Cytion katalog numarası 800100) kullanıyoruz.
Saklama koşulları

Uzun süreli muhafaza için flakonları yaklaşık -150 ila -196 °C'de buhar fazlı sıvı nitrojen içine yerleştirin. 80 °C'de saklama yalnızca sıvı nitrojene aktarılmadan önce kısa bir ara adım olarak kabul edilebilir.

Nakliye koşulları

Kriyoprezerve edilmiş hücre hatları, nakliye boyunca yaklaşık -78 °C'yi korumak için yeterli soğutucu akışkan içeren, onaylanmış, yalıtılmış ambalajlarda kuru buz üzerinde gönderilir. Teslim aldığınızda, kabı hemen inceleyin ve flakonları gecikmeden uygun depoya aktarın.

07Bağışçı

Tür / alt tür
Wistar