RBL-2H3

La línea celular RBL-2H3 se ha convertido en una herramienta valiosa para estudiar la fisiología de los mastocitos. Las células RBL-2H3 expresan la proteasa II de los mastocitos de rata (RMCP-II) y el receptor tirosina quinasa c-kit, lo que las convierte en un modelo potencial para los mastocitos. Sin embargo, se han publicado datos contradictorios y, en ocasiones, engañosos sobre las células RBL-2H3.

Las células RBL-2H3 se han utilizado ampliamente para investigar diversos aspectos de la función de los mastocitos, incluyendo la desgranulación, los estabilizadores de mastocitos y la interacción de los receptores FceRI con el citoesqueleto. Expresan receptores de IgE de alta afinidad y pueden activarse para secretar histamina y otros mediadores. El cultivo de las células RBL-2H3 es relativamente sencillo, y los tiempos de cultivo más prolongados dan como resultado una mayor densidad celular.

La desgranulación es una característica clave de las células RBL-2H3, similar a la de los mastocitos y los basófilos. Cuando los alérgenos forman enlaces cruzados con sus receptores FceRI unidos a IgE, las células RBL-2H3 liberan mediadores preformados y recién sintetizados, lo que contribuye a las respuestas inmunoalérgicas. La desgranulación de las células RBL-2H3 también ha proporcionado información sobre la desgranulación de los basófilos. Estas células también pueden sufrir desgranulación en respuesta a estímulos no inmunológicos, y existen diferencias entre las MMC, las RBL-2H3 y las CTMC.
El papel del calcio en la desgranulación de las células RBL-2H3 es significativo. El ionóforo de calcio A23187, que aumenta los niveles de calcio intracelular, induce la desgranulación en las células RBL-2H3, de manera similar a lo que ocurre con los mastocitos y los basófilos. Algunos estudios han descrito a las células RBL-2H3 como una línea celular liberadora de serotonina.

37 °C, 5 % de CO₂, atmósfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Se descarta la contaminación por micoplasmas mediante ensayos basados en PCR y métodos de detección de micoplasmas basados en luminiscencia.

Para garantizar que no haya contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Para la conservación a largo plazo, coloque los viales en nitrógeno líquido en fase de vapor a una temperatura de entre −150 y −196 °C, aproximadamente. El almacenamiento a −80 °C solo es aceptable como un paso intermedio breve antes de transferirlos al nitrógeno líquido.

Las líneas celulares criopreservadas se envían en hielo seco, en un embalaje aislante validado que contiene suficiente refrigerante para mantener una temperatura de aproximadamente −78 °C durante todo el transporte. Al recibir el envío, revise el contenedor de inmediato y traslade los viales sin demora al lugar de almacenamiento adecuado.

En Cytion, respaldamos la calidad y la viabilidad de nuestros productos. Garantizamos que nuestras células serán viables al inicio del cultivo durante 60 días a partir de la fecha de envío desde nuestras instalaciones. Aseguramos que todos los materiales cumplen con las especificaciones descritas en el Certificado de Análisis y/o la Ficha del Producto.

Para obtener más detalles, consulte nuestra Declaración de garantía.