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CLS-138
Tessuto
La pelle
Malattia
Sarcoma

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CLS-138

Cell line · Codice prodotto 400177

CLS-138 cells were derived from the primary spindle cell sarcoma of female NMRI mice, following the induction of tumors via a single injection of Benzpyre...

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01Informazioni generali

Descrizione

Le cellule CLS-138 sono state derivate dal sarcoma a cellule fusate primario di topi NMRI femmina, in seguito all'induzione del tumore tramite una singola iniezione di benzopirene. Questo sviluppo ha rappresentato una risorsa preziosa per la comunità scientifica, in particolare per coloro che si occupano della complessità dei sarcomi a cellule fusate, un tipo di tumore maligno che origina dal tessuto connettivo. La coltivazione di queste cellule offre una finestra unica per comprendere la fisiopatologia di questi tumori ed esplorare potenziali vie terapeutiche.

L'introduzione delle cellule CLS-138 nella ricerca ha migliorato notevolmente la nostra comprensione dei sarcomi a cellule fusate. Queste cellule consentono un esame dettagliato del panorama molecolare e genetico, facendo luce sulle mutazioni e le anomalie che sono alla base dell'oncogenesi e della progressione di questi tumori. Grazie a questa analisi cellulare e genetica, i ricercatori possono identificare i fattori chiave della malattia e i potenziali bersagli terapeutici.

Inoltre, le cellule CLS-138 costituiscono un modello prezioso per testare gli interventi terapeutici. L'esposizione di queste cellule a vari trattamenti consente di valutare l'efficacia di numerosi agenti e strategie terapeutiche nel frenare la crescita tumorale e indurre l'apoptosi. Questa linea di indagine è fondamentale per lo sviluppo di terapie mirate che potrebbero offrire la speranza di una migliore gestione e dei risultati del trattamento dei pazienti affetti da sarcoma a cellule fusate.

La creazione di cellule CLS-138 da sarcomi a cellule fusate di topi NMRI ha fornito ai ricercatori un modello coerente e replicabile per un'ampia gamma di studi. Queste cellule facilitano le indagini per l'identificazione di biomarcatori, la comprensione delle vie di segnalazione cellulare e la valutazione dei fattori prognostici relativi ai sarcomi a cellule fusate.

In sostanza, le cellule CLS-138 aprono nuove frontiere nello studio dei sarcomi a cellule fusate, offrendo approfondimenti sulle basi molecolari della malattia e sulle possibilità terapeutiche. La loro derivazione da tumori indotti in topi NMRI segna un significativo passo avanti nella ricerca sui sarcomi, promettendo progressi nelle strategie di trattamento e una comprensione più approfondita di questo temibile tipo di cancro.

Tessuto
La pelle
Malattia
Sarcoma

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Donna
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile a un fibroblasto
Tipo di cellula
Cellule fusate
Tumorigenico
Sì, nei topi

04Identificatori

Riferimento bibliografico
CLS-138 (numero di catalogo Cytion 400177)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5726

05Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
2 x 104 cellule/cm2 produrranno uno strato confluente in circa 2 giorni
Rinnovo dei fluidi
Ogni 3-5 giorni
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

07Donatore

Razza / sottospecie
NMRI
Età dei donatori
Adulti