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CLS-138
Tecido
Pele
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Sarcoma

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CLS-138

Cell line · Número do produto 400177

CLS-138 cells were derived from the primary spindle cell sarcoma of female NMRI mice, following the induction of tumors via a single injection of Benzpyre...

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01Informações gerais

Descrição

As células CLS-138 foram derivadas do sarcoma primário de células fusiformes de ratinhos NMRI fêmeas, após a indução de tumores através de uma única injeção de Benzpireno. Este desenvolvimento constituiu um trunfo valioso para a comunidade científica, particularmente para aqueles que se debruçam sobre as complexidades dos sarcomas de células fusiformes - um tipo de tumor maligno com origem no tecido conjuntivo. A cultura destas células proporciona uma janela única para a compreensão da fisiopatologia destes tumores e para a exploração de potenciais vias terapêuticas.

A introdução das células CLS-138 na investigação melhorou significativamente a nossa compreensão dos sarcomas de células fusiformes. Estas células permitem um exame pormenorizado do panorama molecular e genético, lançando luz sobre as mutações e anomalias fundamentais na oncogénese e progressão destes tumores. Através desta análise celular e genética, os investigadores podem identificar os principais factores de doença e potenciais alvos de terapia.

Além disso, as células CLS-138 constituem um modelo inestimável para testar intervenções terapêuticas. A exposição destas células a vários tratamentos permite avaliar a eficácia de numerosos agentes e estratégias terapêuticas na contenção do crescimento tumoral e na indução da apoptose. Esta linha de investigação é crucial para o desenvolvimento de terapias direcionadas que podem oferecer esperança para uma melhor gestão e resultados de tratamento para os doentes com sarcoma de células fusiformes.

O estabelecimento de células CLS-138 a partir dos sarcomas de células fusiformes de ratinhos NMRI proporcionou aos investigadores um modelo consistente e replicável para uma vasta gama de estudos. Estas células facilitam as investigações sobre a identificação de biomarcadores, a compreensão das vias de sinalização celular e a avaliação de factores de prognóstico relevantes para os sarcomas de células fusiformes.

Essencialmente, as células CLS-138 abrem novas fronteiras no estudo dos sarcomas de células fusiformes, oferecendo conhecimentos sobre os fundamentos moleculares da doença e as possibilidades terapêuticas. A sua derivação de tumores induzidos em ratinhos NMRI marca um passo significativo na investigação do sarcoma, prometendo avanços nas estratégias de tratamento e uma compreensão mais profunda deste formidável tipo de cancro.

Tecido
Pele
Doença
Sarcoma

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Feminino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
Tipo fibroblastos
Tipo de célula
Células fusiformes
Tumorigénico
Sim, em ratos

04Identificadores

Referência
CLS-138 (número de catálogo Cytion 400177)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_5726

05Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Densidade de sementeira
2 x 104 células/cm² produzirão uma camada confluente em cerca de 2 dias
Renovação de fluidos
A cada 3 a 5 dias
Recuperação após o descongelamento
Após o descongelamento, coloque as células em placas a uma densidade de 5 x 104 células/cm² e deixe-as recuperar do processo de congelamento e aderir durante pelo menos 24 horas.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

06Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

07Doador

Raça / subespécie
NMRI
Idade do dador
Adulto