NCI-H1299-RFP ląstelės

NCI-H1299 RFP ląstelės, modifikuotos taip, kad į jas būtų įtrauktas DAPK1 geno reporteris, yra naudingos ne tik tiriant konkretaus geno aktyvavimą, bet ir padeda plačiau suprasti, kaip ląstelės reaguoja į epigenetinius vaistus visame pasaulyje. Taikydami metodą, vadinamą genų raiškos analize (Cap Analysis of Gene Expression, CAGE), tyrėjai galėjo išsamiai nustatyti, kur genome prasideda transkripcija, reaguojant į gydymą DNMTi (DAC), HDACi (SAHA arba SB939) ar jų deriniais. Šis metodas atskleidžia ne tik tikėtiną DAPK1 geno reaktyvaciją, bet ir naujų transkripcijos pradžios vietų, vadinamų gydymo sukeltomis neanotuotomis TSS (TINAT), atsiradimą, ypač gydant vaistais. Šios naujos pradžios vietos paprastai yra genomo srityse, kuriose paprastai nesukuriami baltymai, ir jose susidaro naujos RNR molekulės, galinčios koduoti baltymus.

Tolesnė analizė rodo, kad šios naujos RNR molekulės kartais gali susijungti su jau egzistuojančiomis molekulėmis ir sudaryti vadinamuosius TINAT ir eksonų sintezės transkriptus. Priklausomai nuo to, kaip šie transkriptai yra sujungiami, jie gali virsti naujais netipiniais baltymais. Šis procesas patvirtintas laboratoriniais metodais, kurie rodo, kad šie transkriptai iš tiesų gali lemti naujų baltymų formų gamybą. Šie baltymai gali neįprastai sąveikauti ląstelėje arba būti imuninės sistemos atpažįstami kaip svetimkūniai, o tai gali būti nauji vėžio gydymo taikiniai.

Šių TINAT aktyvavimas susijęs su sudėtingais DNR metilinimo ir histonų modifikacijų pokyčiais, o tai rodo sudėtingą šių epigenetinių veiksnių sąveiką gydant vaistais. Ypač didelis poveikis pasireiškia kartu naudojant DAC ir SB939, kurie padidina šių naujų transkriptų raišką labiau nei naudojant vieną iš šių vaistų. Šių sąveikų ir jų rezultatų supratimas padeda išsiaiškinti, kaip epigenetiniai gydymo būdai keičia ląstelių elgseną, ir atveria galimybes naujiems vėžio gydymo būdams, kurie panaudoja šiuos sudėtingus molekulinius pokyčius.

37 °C, 5 %_CO2, drėkintoje atmosferoje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

" Cytion" garantuoja savo produktų kokybę ir gyvybingumą. Garantuojame, kad mūsų ląstelės bus gyvybingos kultūrų auginimo pradžioje 60 dienų po išsiuntimo iš mūsų gamyklos. Užtikriname, kad visos medžiagos atitinka analizės sertifikate ir (arba) gaminio lape aprašytas specifikacijas

Išsamią informaciją rasite mūsų <a href=""/Kas mes esame/garantijos/" hreflang=""x-default"">Garantijos pareiškime