NCI-H1299-RFP šūnas

NCI-H1299 RFP šūnas, kas modificētas, lai iekļautu DAPK1 gēna reportieri, ir ne tikai noderīgas specifisku gēnu aktivizācijas izpētei, bet arī sniedz plašāku izpratni par to, kā šūnas reaģē uz epigenētiskajām zālēm visā pasaulē. Izmantojot metodi, ko dēvē par gēnu ekspresijas analīzes vāciņu (CAGE), pētnieki ir spējuši detalizēti noteikt izmaiņas transkripcijas sākumpunktā visā genomā, reaģējot uz ārstēšanu ar DNMTi (DAC), HDACi (SAHA vai SB939) vai to kombinācijām. Šī metode atklāj ne tikai sagaidāmo DAPK1 gēna reaktivizāciju, bet arī jaunu transkripcijas sākuma vietu rašanos, ko sauc par ārstēšanas izraisītām neanotētām TSS (TINAT), īpaši ārstēšanas ar zālēm laikā. Šīs jaunās sākuma vietas parasti atrodas genoma reģionos, kuros parasti neveidojas olbaltumvielas, un to rezultātā rodas jaunas RNS molekulas, kas potenciāli varētu kodēt olbaltumvielas.

Turpmāka analīze liecina, ka šīs jaunās RNS molekulas dažkārt var saplūst ar esošajām, veidojot tā sauktos TINAT-eksonu saplūšanas transkriptus. Atkarībā no tā, kā šie transkripti tiek sajaukti, tie var pārvērsties jaunos, netipiskos proteīnos. Šis process ir apstiprināts, izmantojot laboratorijas metodes, kas pierāda, ka šie transkripti patiešām var radīt jaunas olbaltumvielu formas. Šīs olbaltumvielas var nenormāli mijiedarboties šūnā vai imūnsistēma tās var atpazīt kā svešas, tādējādi potenciāli piedāvājot jaunus mērķus vēža terapijai.

Šo TINAT aktivizācija ir saistīta ar sarežģītām izmaiņām gan DNS metilēšanā, gan histonu modifikācijās, ilustrējot šo epigenētisko faktoru sarežģīto mijiedarbību zāļu iedarbības laikā. Jo īpaši DAC un SB939 kombinēta lietošana uzrāda lielāku iedarbību, palielinot šo jauno transkriptu ekspresiju vairāk nekā tad, ja lieto kādu no šīm zālēm atsevišķi. Izpratne par šīm mijiedarbībām un to rezultātiem palīdz noskaidrot, kā epigenētiskā terapija maina šūnu uzvedību, un paver iespējas jauniem vēža ārstēšanas veidiem, kas izmanto šīs sarežģītās molekulārās pārmaiņas.

37°C, 5%_CO2, mitrināta atmosfēra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām

Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu