Bunky NCI-H1299-RFP

Bunky NCI-H1299 RFP, modifikované tak, aby obsahovali reportér v géne DAPK1, sú užitočné nielen na štúdium aktivácie špecifických génov, ale umožňujú aj širšie pochopenie toho, ako bunky reagujú na epigenetické lieky v globálnom meradle. Pomocou techniky nazývanej Cap Analysis of Gene Expression (CAGE) vedci dokázali podrobne popísať zmeny v mieste začiatku transkripcie v celom genóme v reakcii na liečbu DNMTi (DAC), HDACi (SAHA alebo SB939) alebo ich kombináciami. Táto metóda odhaľuje nielen očakávanú reaktiváciu génu DAPK1, ale aj vznik nových miest štartu transkripcie, nazývaných liečbou indukované neanotované TSS (TINAT), najmä pri liečbe liekmi. Tieto nové štartovacie miesta sa zvyčajne nachádzajú v oblastiach genómu, ktoré zvyčajne neprodukujú proteíny, a vedú k vzniku nových molekúl RNA, ktoré by potenciálne mohli kódovať proteíny.

Ďalšia analýza ukazuje, že tieto nové molekuly RNA sa niekedy môžu spojiť s existujúcimi a vytvoriť takzvané fúzne transkripty TINAT-exon. V závislosti od toho, ako sú tieto transkripty spájané, sa môžu premeniť na nové, netypické proteíny. Tento proces bol potvrdený laboratórnymi technikami, ktoré dokazujú, že tieto transkripty môžu skutočne viesť k tvorbe nových foriem proteínov. Tieto proteíny môžu v bunke abnormálne interagovať alebo ich imunitný systém rozpozná ako cudzie, čo môže ponúknuť nové ciele pre liečbu rakoviny.

Aktivácia týchto TINAT zahŕňa zložité zmeny v metylácii DNA aj v modifikáciách histónov, čo ilustruje komplexnú interakciu medzi týmito epigenetickými faktormi pri liečbe liekmi. Najmä kombinované použitie DAC a SB939 vykazuje väčší účinok a zvyšuje expresiu týchto nových transkriptov viac, ako keď sa použije jedno z týchto liečiv samostatne. Pochopenie týchto interakcií a ich výsledkov pomáha objasniť, ako epigenetické terapie menia správanie buniek, a otvára možnosti pre novú liečbu rakoviny, ktorá využíva tieto komplexné molekulárne zmeny.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke