Celice NCI-H1299-RFP

Celice NCI-H1299 RFP, ki so bile spremenjene tako, da vključujejo poročevalec v genu DAPK1, niso uporabne le za preučevanje aktivacije določenega gena, temveč omogočajo tudi širše razumevanje, kako se celice globalno odzivajo na epigenetska zdravila. Z uporabo tehnike, imenovane Cap Analysis of Gene Expression (CAGE), so raziskovalci lahko podrobno opredelili spremembe v tem, kje se začne transkripcija po genomu kot odziv na zdravljenje z DNMTi (DAC), HDACi (SAHA ali SB939) ali njihovimi kombinacijami. Ta metoda ne razkriva le pričakovane reaktivacije gena DAPK1, temveč tudi pojav novih začetnih mest transkripcije, imenovanih z zdravljenjem povzročeni neanotirani TSS (TINAT), zlasti pri zdravljenju z zdravili. Ta nova začetna mesta se običajno nahajajo v predelih genoma, kjer se običajno ne proizvajajo beljakovine, in vodijo v nastanek novih molekul RNK, ki bi lahko potencialno kodirale beljakovine.

Nadaljnja analiza je pokazala, da se te nove molekule RNK včasih lahko združijo z obstoječimi in tvorijo tako imenovane fuzijske transkripte TINAT-exon. Odvisno od tega, kako so ti transkripti zlepljeni, se lahko pretvorijo v nove, netipične beljakovine. Ta proces je bil potrjen z laboratorijskimi tehnikami, ki dokazujejo, da lahko ti transkripti dejansko privedejo do nastanka novih oblik beljakovin. Te beljakovine lahko v celici delujejo nenormalno ali pa jih imunski sistem prepozna kot tuje, kar lahko ponudi nove tarče za zdravljenje raka.

Aktivacija teh TINAT vključuje zapletene spremembe metilacije DNK in modifikacij histonov, kar ponazarja zapleteno interakcijo med temi epigenetskimi dejavniki pri zdravljenju z zdravili. Zlasti kombinirana uporaba DAC in SB939 kaže večji učinek, saj poveča izražanje teh novih transkriptov bolj, kot če se uporabi samo eno od zdravil. Razumevanje teh interakcij in njihovih rezultatov pomaga pojasniti, kako epigenetske terapije spreminjajo obnašanje celic, in odpira možnosti za nova zdravljenja raka, ki bi izkoristila te zapletene molekularne spremembe.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo