NCI-H1299-RFP rakud

NCI-H1299 RFP rakud, mis on modifitseeritud, et lisada DAPK1 geeni reporter, ei ole kasulikud mitte ainult konkreetse geeni aktiveerimise uurimiseks, vaid annavad ka laiema arusaama sellest, kuidas rakud reageerivad epigeneetilistele ravimitele globaalselt. Kasutades tehnikat nimega Cap Analysis of Gene Expression (CAGE), on teadlased suutnud üksikasjalikult kirjeldada muutusi selles, kus transkriptsioon algab kogu genoomis vastuseks ravile DNMTi (DAC), HDACi (SAHA või SB939) või nende kombinatsioonidega. See meetod näitab mitte ainult DAPK1 geeni oodatud reaktiveerimist, vaid ka uute transkriptsiooni alguskohtade, nn ravi poolt indutseeritud mitte-annoteeritud TSS-ide (TINAT) tekkimist, eriti ravimiravi korral. Need uued alguskohad asuvad tavaliselt genoomi piirkondades, mis tavaliselt ei tooda valke, ja põhjustavad uute RNA-molekulide tekkimist, mis võivad potentsiaalselt kodeerida valke.

Edasine analüüs näitab, et need uued RNA-molekulid võivad mõnikord ühineda olemasolevate molekulidega, moodustades nn TINAT-eksoonide fusioonitranskripte. Sõltuvalt sellest, kuidas need transkriptid splaissitakse, võivad need tõlkida uuteks ebatüüpilisteks valkudeks. Seda protsessi on kinnitatud laboratoorsete meetoditega, mis näitavad, et need transkriptid võivad tõepoolest viia uute valguvormide tekkimiseni. Need valgud võivad rakus ebatavaliselt suhelda või immuunsüsteem võib neid võõrkehadena ära tunda, mis võib pakkuda uusi sihtmärke vähiravi jaoks.

Nende TINATide aktiveerimine hõlmab keerulisi muutusi nii DNA metüleerimises kui ka histoonide modifikatsioonides, mis näitab nende epigeneetiliste tegurite keerulist koostoimet ravimravi korral. Eriti suur mõju on DAC ja SB939 kombineeritud kasutamisel, mis suurendab nende uudsete transkriptide ekspressiooni rohkem kui kummagi ravimi eraldi kasutamisel. Nende koostoimete ja nende tulemuste mõistmine aitab selgitada, kuidas epigeneetilised ravimeetodid muudavad rakkude käitumist, ning avab võimalusi uute vähiravi meetodite jaoks, mis kasutavad ära neid keerulisi molekulaarseid muutusi.

37°C, 5%_CO2, niisutatud atmosfäär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

Cytion seisab oma toodete kvaliteedi ja elujõulisuse eest. Me garanteerime, et meie rakud on elujõulised kasvatamise alguses 60 päeva jooksul pärast meie rajatistest saatmist. Tagame, et kõik materjalid vastavad analüüsisertifikaadis ja/või tootelehel kirjeldatud spetsifikatsioonidele

Täielikke üksikasju leiate meie <a href="""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Tagatise avaldusest